ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
液體生物防腐劑，100ml　進(jìn)口/原裝 Proflavine hydrochloride　規(guī)格：>98%,BR

液體生物防腐劑，50ml　進(jìn)口/原裝 Profenofos　規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

布魯諾廣譜高效殺菌劑，100ml　進(jìn)口/原裝 Procymidon　規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品"

布魯諾廣譜高效殺菌劑，25ml　進(jìn)口/原裝Procyanidin B2　規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

1，3-二甲基脲，100g　進(jìn)口/原裝 Procyanidin B1　規(guī)格：HPLC≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品

1，3-二甲基脲，500g　進(jìn)口/原裝 Procyanidin　規(guī)格：>95%,葡萄籽提取物

鈀碳加氫催化劑，25g　進(jìn)口/原裝 Procyanidin　規(guī)格：UV>95%,分析標(biāo)準(zhǔn)品

鈀碳加氫催化劑，5g　進(jìn)口/原裝 Prochlorperazine　規(guī)格：含量測(cè)定

偶氮脒類引發(fā)劑V30，100g　進(jìn)口/原裝 Prochlorperazine　規(guī)格：>98%,BR

phospho-EGFR (Ser768)  磷表皮生長(zhǎng)因子受體抗體    * 0.1ml Sec-O-Glucosylhamaudol

phospho-EGFR (Tyr1016)  磷表皮生長(zhǎng)因子受體抗體    * 0.1ml Wogonoside

phospho-EGFR (Ser1142)  磷表皮生長(zhǎng)因子受體抗體    * 0.1ml Wogonin

phospho-EGFR (Ser967)  磷表皮生長(zhǎng)因子受體抗體    * 0.1ml Ligustilide

EGF  表皮生長(zhǎng)因子抗體（大鼠）    * 0.1ml Honokiol

EGFL7  類表皮生長(zhǎng)因子域7抗體    * 0.1ml Honokiol

MUC13  粘蛋白13抗體    * 0.2ml Honokiol

EGFR  表皮生長(zhǎng)因子受體抗體    * 0.1ml Tetrodotoxin

Irisflorentin神經(jīng)肽Y（2-36），人，大鼠  分子式：C28H40O6  性狀：Yellow powder  純度：98.0%

Vapreotide神經(jīng)肽Y（22-36）  分子式：C15H24O  性狀：Powder  純度：%

Teriparatide acetate神經(jīng)肽Y（3-36），豬  分子式：C15H24O  性狀：Oil  純度：%

Saikosaponin C骨鈣素（7-19），人  分子式：C15H24O  性狀：Oil  純度：%

Atractyloside A成骨生長(zhǎng)肽  分子式：C28H40O6  性狀：Yellow powder  純度：93.0%

Chasmanine骨抑制素，人  分子式：C15H28O2  性狀：Powder  純度：98.0%

(9Z)-N-[(3-Methoxyphenyl)methyl]-9-octadecenamide骨抑制素（1-5）酰胺，人，牛，狗，大鼠，鼠，兔，馬  分子式：C15H20O3  性狀：Oil  純度：70.0%

Nerolidol骨抑制素酰胺，人  分子式：C15H24O  性狀：Oil  純度：%

Bonvalotidine Ap60 v-結(jié)構(gòu)域（137-157）  分子式：C28H38O7  性狀：Yellow powder  純度：97.5%

乙酰膽受體抗體(AChRab)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： AChRab ELISA Kit

抗Mi2抗體(ai-Mi2-Ab)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanai-Mi2-aibodyELISAKit 96T/48T

γ干擾素受體(IFN-γR)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat Ierferon γ Receptor,IFN-γR ELISA Kit

CLIAKitfoAbELISAKit狀抗體規(guī)格：48T/96T

體ras基因基化檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitLC1抗肝胞質(zhì)1型抗體規(guī)格：48T/96T

D-乳(D-LAC)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

兔心肌特異性肌鈣蛋白T(c)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit cardiac isoform of opnin T,c ELISA Kit

潛伏轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β結(jié)合蛋白2(LTBP2)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： LTBP2 ELISA Kit

RabbitGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSF酶聯(lián)免疫試劑盒兔粒集落激因子(G-CSF)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanai-nucleolusaibody,ANA酶聯(lián)免疫試劑盒抗核仁抗體(ANA)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanCaveolin-1,Cav-1ELISAKit窖蛋白(Cav-1)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
ST人血清素/血清胺ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理HLA-E/FITC  熒光素標(biāo)記人類白抗原EIgG染色質(zhì)修飾蛋白4B(4C)抗體3-氨基-2,6-二甲基吡Rat THP (Tamm–Horsfall Glycoprotein) ELISA Kit

HLA-G/FITC  熒光素標(biāo)記人類白抗原G/組織相容性白抗原G抗體IgG磷化非受體酪氨激酶c-Abl抗體3-氨基-2,6-二甲基吡Rat TRACP-5b (Tartrate-Resistant Acid Phosphatase 5b) ELISA Kit

HMGA1/FITC  熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白A1抗體IgG磷化非受體酪氨激酶c-Abl抗體BOC-L-Α-氨基吲哚丁Rat TBP (Tata Binding Protein) ELISA Kit

HMGA2/FITC  熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白A2抗體IgG磷化非受體酪氨激酶c-Abl抗體BOC-L-Α-氨基吲哚丁Rat TAF1 (Tata Box Binding Protein Associated Factor 1) ELISA Kit

HMGB1/FITC  熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白B1抗體IgG酪蛋白激酶1γ2抗體4--3-Rat TAF4 (Tata Box Binding Protein Associated Factor 2) ELISA Kit

HMGB4/FITC  熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白B4抗體IgG柯薩奇病蛋白受體B抗體4--3-Rat MAPτ (Microtubule Associated Protein Tau) ELISA Kit

HNF-1 Alpha/FITC  熒光素標(biāo)記肝核因子1α抗體IgG腫瘤抑制因子FBW7抗體3--4-苯甲R(shí)at TXLNA (Taxilin Alpha) ELISA Kit

HO-1/HSP32/FITC  熒光素標(biāo)記血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗體IgG粘附分子4抗體3--4-苯甲R(shí)at TXLNB (Taxilin Beta) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)