ATP含量HPLC法檢測試劑盒HPLC法-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-01S63436

商品介紹：

測定意義

ATP廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，是生物能量通貨，能荷是描述細胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測定ATP含量并且計算能荷，能夠反映能量代謝狀態(tài)。

測定原理：

肌酸激酶催化肌酸和ATP反應生成磷酸肌酸，可在700nm下用磷鉬酸比色法檢測磷酸肌酸含量，以此反應ATP含量。

自備儀器和用品：

分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務于高校及免疫學科研單位，竭誠為您提供更周到的服務更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：ATP含量HPLC法檢測試劑盒HPLC法

規(guī)格：50管/48樣

檢測方法：HPLC法

貨號：FS-01S63436
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操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

粗酶液提取：

1、細胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細胞：先收集細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

兔G蛋白偶聯(lián)雌受體1(GPER1)試劑盒Anti-EDA Antibody磷化成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體

兔白介4(IL-4)試劑盒Anti-EDNRB Antibody磷化G蛋白信號轉(zhuǎn)導調(diào)節(jié)因子19抗體

兔衰老關鍵蛋白4(FBLN4)試劑盒Anti-EDNRB Antibody(PB0585)G蛋白信號轉(zhuǎn)導調(diào)節(jié)因子19抗體

兔成纖維生長因子受體1(FGFR1)試劑盒 Anti-EED Antibody環(huán)指蛋白1抗體

兔胱天蛋白14(P14)試劑盒 Anti-EEA1 Antibody原癌基因c-Met相關酪激抗體

兔金屬硫蛋白2 (MT2)試劑盒Anti-EGF Antibody磷化原癌基因c-Met相關酪激抗體

兔山梨脫氫(SDH)試劑盒Anti-EGF Antibody腫瘤血管內(nèi)皮調(diào)節(jié)蛋白Robo4抗體

兔腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1(ABCA1)試劑盒 Anti-EGF Antibody軸突導向受體抗體

兔α2巨球蛋白(α2-M)試劑盒Anti-EGF Antibody絡絲蛋白抗體

兔白介1α(IL-1α)試劑盒Anti-EGFR AntibodyRUSC1抗體

兔血小板因子3(PF3)試劑盒Anti-EGFL6 AntibodyRUSC2抗體

兔TATA結(jié)合蛋白(TBP)試劑盒Anti-EGFR AntibodyRAGEF2蛋白抗體

兔二氫硫辛轉(zhuǎn)乙酰(DLAT)試劑盒Anti-EGFR AntibodyG蛋白偶聯(lián)受體RAB23抗體

兔乳脫氫A(LDHA)試劑盒 Anti-EGFR AntibodyG蛋白信號調(diào)節(jié)因子14抗體

兔內(nèi)皮受體B(ETRB)試劑盒Anti-EGFR Antibody核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體/核因子kB受體活化因子抗體
ATP含量HPLC法檢測試劑盒HPLC法信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體Anti-NR4A1 Antibody基磁珠2mL圖片

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滑膜凋亡抑制物1抗體Anti-NRG1 Antibody4mL DNA 離心超濾管（9-15 KD）1個規(guī)格