當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TNO人一氧化氮ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | NO人一氧化氮ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human nitric oxide, NO Elisa Kit |
貨號 | FS-H64131 |
公司“質量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
石骨癥相關蛋白PLEKHM1抗體英文全稱Angiopoietin 1英文簡稱ANG-1 檢測范圍:7473nmol/L-4000pg/mL
增殖相關蛋白NANOS2抗體英文全稱cortisone英文簡稱cortisone 檢測范圍:6703nmol/L-1000pg/ml
增殖相關蛋白NANOS1抗體英文全稱Parvovirus IgG antibody英文簡稱CPV-IgG 檢測范圍:6687nmol/L-800ng/mL
樣蛋白1樣蛋白抗體英文全稱βcross linked C-opeptide of type I collagen 英文簡稱β-CTX 檢測范圍:4391nmol/L-8ng/mL
核因子GCNF/維甲受體相關受體抗體英文全稱Cytochrome P450 2d12英文簡稱cyp2d12 檢測范圍:4556nmol/L-100U/L
發(fā)育相關蛋白DAZL抗體英文全稱Lysophosphatidylcholine Acyltransferase2英文簡稱LPCAT2 檢測范圍:2927nmol/L-1000ng/mL
生長終止特異性同源盒基因抗體英文全稱ACA英文簡稱ACA 檢測范圍:4766nmol/L-200ng/mL
生長因子受體結合適應蛋白抗體英文全稱protein tyrosine phosphatase antibody英文簡稱IA-2A 檢測范圍:4298nmol/L-200ng/mL
Isoluminol 規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 接頭蛋白DOK7抗體
Bis[3,4,6-trichloro-2-(pentyloxycarbonyl)phenyl]Oxalate 規(guī)格:>98.0%(HPLC) 腺樣癌特異性相關抗原EMC1抗體
Disodium8-Amino-1,3,6-naphthalene3sulfonateHydrate 規(guī)格:>99.0%(HPLC)(T) 磷化上皮癌轉化蛋白2抗體
Coumarin102 規(guī)格:>97.0%(HPLC)(N) 早期發(fā)育調控蛋白1抗體
Coumarin314 規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N) 紅膜相關蛋白ERMAP抗體
FluoresceinChloride 規(guī)格:>90.0%(HPLC) ETS相關蛋白71抗體
2',7'-Dichlorofluorescein 規(guī)格:>95.0%(HPLC) 外胚層發(fā)育不良蛋白1抗體
2,3-Diaminonaphthalene 規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 軟骨素蛋白多糖3抗體
DimidiumBromide 規(guī)格:>95.0%(HPLC)(N) EYA3蛋白抗體
抑制素B(INH-B)酶聯免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
胸表達趨化因子(BRAK/CXCL14)酶聯免疫試劑盒 Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK ELISA Kit
線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ活性測試盒 紫外分光光度法 25管/24樣
Ratlymphocytefactor酶聯免疫試劑盒淋巴因子酶聯免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangrowth-regulatedoncogeneγ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROγ/MGSA酶聯免疫試劑盒生長調節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)酶聯免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit鉤端螺旋體IgG(LepIgG)酶聯免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Clara分泌蛋白(CC-SP)酶聯免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔去(NA)酶聯免疫試劑盒 Rabbit Noradrenaline,NA ELISA Kit
前列環(huán)素(PGI)酶聯免疫試劑盒 ,英文名: PGI ELISA Kit
rabbitInsulin,INS酶聯免疫試劑盒胰島素(INS)酶聯免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanai-redcellaibody酶聯免疫試劑盒抗紅抗體(RBC)酶聯免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humancholecystokininoctapeptide,CCK-8ELISAKit膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)酶聯免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
NO人一氧化氮ELISA試劑盒實驗原理IL-7/FITC 熒光素標記白介素7抗體IgG3號染色體開放閱讀框19抗體3--4'-苯Rat Ta1 (Thymosin-α1) ELISA Kit
Il-7R a/CD127 /FITC 熒光素標記白介素-7受體a抗體IgG色素c氧化酶5A抗體1,5-環(huán)辛二烯(六乙酰)(I)銥Rat LEPR (Leptin Receptor) ELISA Kit
IL-8/FITC 熒光素標記兔抗人、牛、豬、羊、兔白介素8抗體IgG卷曲螺旋結構域蛋白60抗體二(2,6,10-十二碳三烯-1,12-二基)釕(IV)Rat PCIII (Procollagen III) ELISA Kit
IL-9/FITC 熒光素標記白介素9抗體IgG卷曲螺旋結構域蛋白144A抗體2--4-羥基苯甲Rat fT3 (Free Triiodothyronine) ELISA Kit
IL-10/FITC 熒光素標記白介素10抗體IgG周期素B3抗體4-Rat 5-HIAA (5-Hydroxyindolacetic Acid) ELISA Kit
IL-10R/CD210/FITC 熒光素標記白介素-10受體抗體IgG羧肽酶X(M14家族2)抗體4-Rat FLAP (5-Lipoxygenase Activating Protein) ELISA Kit
IL-10R Beta/IL10RB/CDw210b/FITC 熒光素標記白介素-10受體β抗體IgG上皮鈣粘附分子結合蛋白E7乙酰乙鋰Rat PON1 (Paraoxonase 1) ELISA Kit
IL-11/FITC 熒光素標記白介素11抗體IgG周期素D結合蛋白1抗體乙酰乙鋰Rat DNMT1 (DNA Methyltransferase 1) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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