產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：小鼠成肌細胞    

產(chǎn)品英文：C2C12

貨號：FS-01X9654

細胞培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS+1%P/S

生長狀態(tài)：貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細胞STR鑒定：不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運輸溫度（℃）：常溫   

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒 Human β-lactamase ELISA Kit

人β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA試劑盒 Human α mannosidase，α Manase ELISA Kit

人肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒 Human Creatine Kinase，CK ELISA Kit

人蛋白激酶C(PKC)ELISA試劑盒Human protein kinase C，PKC ELISA Kit

人醛縮酶(ALD)ELISA試劑盒Human Aldolase，ALD ELISA Kit

人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒Human L-Lactate Dehydrogenase，L-LDH ELISA Kit

人8(KLK 8)ELISA試劑盒 Human urokinase-type plasminogen activator，uPA/PLAU ELISA Kit

人6(KLK 6)ELISA試劑盒 Human Kallikrein 6，KLK 6 ELISA Kit

人(LZM)ELISA試劑盒 Human Lysozyme，LZM ELISA Kit

人(PP)ELISA試劑盒Human Pepsin，PP ELISA Kit

人碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒Human carbonic anhydrase 2，CA-2 ELISA Kit

人顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒Human granzymes B，Gzms-B ELISA Kit

人顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒Human granzymes A，Gzms-A ELISA Kit

人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒Human tartrate-resistant acid phosphatase 5b，TRACP-5b ELISA Kit

人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒Human Pyruvate Kinase，M2-PK ELISA Kit

人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒Human inducible nitric oxide synthase，iNOS ELISA Kit

人磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒Human Phospholipidase A2，PL-A2 ELISA Kit

人一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒Human nitric oxide synthase，NOS ELISA Kit

人端粒酶(TE)ELISA試劑盒Human telomerase，TE ELISA Kit
小鼠成肌細胞ACOX2  過氧化物酶酰基A氧化酶2抗體 0.2ml

ADCY1  腺苷酸環(huán)化酶1抗體 0.2ml

ADCY2  腺苷酸環(huán)化酶2抗體 0.2ml

ADCY3  腺苷酸環(huán)化酶3抗體 0.2ml

ADCY4  腺苷酸環(huán)化酶4抗體 0.2ml

ADCY5  腺苷酸環(huán)化酶5抗體 0.2ml

ADCY6  腺苷酸環(huán)化酶6抗體 0.2ml

ADCY7  腺苷酸環(huán)化酶7抗體 0.2ml