商品介紹：

產(chǎn)品公司所有產(chǎn)品均不得用于人類(lèi)或動(dòng)物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：
(1)  細(xì)胞的收獲
用來(lái)凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿(mǎn) 90% 的時(shí)候，這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來(lái)凍存的細(xì)胞開(kāi)始時(shí)方法和平時(shí)一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬(wàn) 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2)  保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3)  細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過(guò)度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí)，再放入 -80℃冰箱過(guò)夜(如果沒(méi)有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4)  儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。

公司正在出售的產(chǎn)品：

SDF-1a/CXCL12(Mouse Stromal cell derived factor 1a) ELISA Kit 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1aMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-p57 Kip2 (Thr310)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化周期蛋白依賴(lài)激酶抑制因子1C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Goat IgG/PE PE標(biāo)記的驢抗羊IgG 規(guī)格 0.1ml

FSH Poultry ELISA Kit FSH 禽類(lèi)酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒 96T

LMP7 英文名稱(chēng)： 低分子量蛋白7抗體 0.2ml

ATXN1/Ataxin-1 英文名稱(chēng)： 脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體 0.2ml

Anti-Phospho-p57 Kip2 (Thr310)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化周期蛋白依賴(lài)激酶抑制因子1C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-SAP-1/FITC 熒光素標(biāo)記抗突觸素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

HCV-NS3 丙型肝炎病毒-NS3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

脯羥化酶抗體 Anti-Prolylhydroxylase 0.1ml

SM22 Alpha 英文名稱(chēng)： 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白抗體 0.1ml

LMP2A 英文名稱(chēng)： EB病毒LMP-2A蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-MKP1 (Ser318) 0酸化原活化蛋白激酶0酸酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

HCV-NS3 丙型肝炎病毒-NS3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

LPA(Mouse L-phenylalanine) ELISA Kit 小鼠苯丙Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CK4/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh DOCK1 細(xì)胞質(zhì)分裂付出蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

Guinea IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記豚鼠IgM 0.3ml

LMP2 英文名稱(chēng)： 低分子質(zhì)量蛋白2抗體 0.1ml

()快速檢測(cè)卡 50T/盒 各種動(dòng)物肌肉組織、肝臟、尿液、血清、飼料等

MKN-45人胃癌細(xì)胞Anti-CK4/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

p53 (Rabbit p53/tumor protein) ELISA Kit 兔p53Multi-class antibodies規(guī)格： 96T

Anti-Phospho-Cyclin D1 (Thr286) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化cyclin D1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh DAPK1 凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

Bovine IgM/PE 熒光素PE標(biāo)記IgM 0.1ml

LMO4 英文名稱(chēng)： 自身抗原LMO4抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ZO-1 胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗體(閉鎖小帶蛋白1) 規(guī)格 0.1ml

Anti-Phospho-Cyclin D1 (Thr286) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化cyclin D1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

操作步驟:

(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過(guò)大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。

(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)

A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。

B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。

分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。

(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時(shí)，吸除無(wú)血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。

(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過(guò)表達(dá)效率。