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人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;TE671 Subline No.2
貨號 | AXB9722 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | MHCC97-L(低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞) | 貨號 | AXB9722 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | MHCC97L:MHCC97-L |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹:
別稱 | MHCC 97-L |
年齡(性別) | 39歲 |
組織來源 | 肝;肝癌 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時(shí),吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
TXB2 ELISA Kit 大鼠血栓素B2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ACE1/FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Fibrinopeptide A 纖維蛋白肽A/血纖肽抗體 規(guī)格 0.2ml
BrdU ELISA Kit 大鼠溴脫氧核苷 96T
Mannose Receptor 英文名稱: 巨噬細(xì)胞甘露糖受體抗體 0.2ml
ACSM3 英文名稱: 丁酰基合成酶3抗體 0.2ml
Anti-ACE1/FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
A1c ELISA Kit 大鼠糖化血紅蛋白A1cMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-AARS2/FITC 熒光素標(biāo)記丙氨酰tRNA合成酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FMDV Polyprotein (3A protein) 口蹄疫病毒A型抗體 規(guī)格 0.2ml
Human L-Selectin ELISA kit 人L選擇素 96T
Mannan Binding Lectin 英文名稱: 甘露聚糖結(jié)合凝集素抗體 0.2ml
AIF 英文名稱: 調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體 0.1ml
Anti-AARS2/FITC 熒光素標(biāo)記丙氨酰tRNA合成酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
FA(Mouse Folic acid) ELISA Kit 小鼠Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CDK6/FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
BLC-1/CXCL13(Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1) ELISA Kit 人B-淋巴細(xì)胞趨化因子 96T
Manic Fringe 英文名稱: 狂躁基因同源蛋白MFNG抗體 0.2ml
Phospho-Acetyl Coenzyme A carboxylase alpha (Ser78) 英文名稱: 0酸化乙酰羧化酶抗體 0.1ml
Anti-CDK6/FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
I CTP ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
MHCC97-L(低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞)Anti-BMPR-1A/FITC 熒光素標(biāo)記骨成型蛋白受體1A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EphB6 酪蛋白激酶受體B6抗體 規(guī)格 0.1ml
D-LDH ELISA Kit 大鼠D-乳酸脫氫酶 96T
Mammaglobin B 英文名稱: 珠蛋白2抗體 0.1ml
ATE1 英文名稱: 精酸t(yī)RNA的蛋白轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml
Anti-BMPR-1A/FITC 熒光素標(biāo)記骨成型蛋白受體1A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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