當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TPROGR小鼠孕酮受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅨ小鼠凝血因子ⅨELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
公司產(chǎn)品僅用于科研
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | PROGR小鼠孕酮受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Rat Progesterone receptor, PROGR Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-R64174 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
LSHR Polyclonal Antibody 促黃體生成素受體抗體
SEGN Polyclonal Antibody 促分泌素抗體
GCK/GLK Polyclonal Antibody 促分裂原活蛋白激酶激酶激酶激酶2抗體
HRK Polyclonal Antibody 促凋亡蛋白HRK抗體
PACAP Polyclonal Antibody 促凋亡caspase適配器蛋白抗體
PXDC2 Polyclonal Antibody 叢狀蛋白域含蛋白2抗體
PLXD1 Polyclonal Antibody 叢狀蛋白D1抗體
PLXB1 Polyclonal Antibody 叢狀蛋白B1抗體
PLXA4 Polyclonal Antibody 叢狀蛋白A4抗體
PLXA2 Polyclonal Antibody 叢狀蛋白A2抗體
MAL T淋巴成熟相關(guān)蛋白抗體 * 0.2ml 1Naphthyl PP1
NOX5 還原型輔酶Ⅱ氧酶5/煙酰腺嘌呤二核苷抗體 * 0.2ml Aliskiren hemifumarate
Nucleostemin 核干因子抗體(鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白3) * 0.2ml Epothilone D
PDCD10 凋亡相關(guān)蛋白10抗體 * 0.2ml Calcium levofolinate
Fascin/Actin bundling protein 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Fascin抗體 * 0.2ml Afatinib dimaleate /BIBW2992MA2
SLPI/ALK1 分泌型白蛋白酶抑制因子抗體 * 0.2ml Citicoline sodium
TPST1 酪蛋白轉(zhuǎn)移酶1抗體 * 0.2ml Erythromycin stearate
TPST2 酪蛋白轉(zhuǎn)移酶2抗體 * 0.2ml Spermine
胡黃蓮苷-I Hu Huanglian glycoside -I 規(guī)格:20mg
1,3-0二啡酰奎寧 1,3-0 two caffeoylquinic acid 規(guī)格:20mg
胡薄荷 Pulegone 規(guī)格:0.2ml
(-)-薄荷 (-) - menthone 規(guī)格:0.2ml
芒柄花素 Formononetin 規(guī)格:20mg
梣 Fraxinellone 規(guī)格:20mg
蓮心鹼高鹽 Liensinine perchlorate 規(guī)格:20mg
十七碳甲酯 Seventeen methyl carbonate 規(guī)格:20mg
甘油三亞油酯 Sanya oleic acid ester of glycerol 規(guī)格:0.15ml
甘油三油酯 Three oleic acid ester of glycerol 規(guī)格:0.15ml
香荊芥酚 Carvacrol 規(guī)格:0.15ml
白果新(銀杏) Ginkgolic acid (Yin Xingsuan) 規(guī)格:20mg
PROGR小鼠孕酮受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理對(duì)接蛋白EFS抗體Porcine NRG-4 (Neuregulin 4) ELISA Kit
酪氨蛋白激酶A5受體抗體Porcine ADCY2 (Adenylate Cyclase 2) ELISA Kit
內(nèi)皮分化G蛋白偶聯(lián)受體8抗體Porcine PGD2-MOX (Prostaglandin D2-Methoxime) ELISA Kit
神經(jīng)鳥苷置換因子NGEF抗體Porcine OFQ/N (Orphanin FQ/Nociceptin) ELISA Kit
磷化真核啟動(dòng)因子2α抗體Porcine RCOR3 (Rest Corepressor 3) ELISA Kit
長鏈脂肪延長酶ELOVL2抗體Porcine CD30 (Cluster of Differentiation 30) ELISA Kit
長鏈脂肪延長酶長ELOVL5抗體Porcine PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit
有脊椎動(dòng)物腦發(fā)育相關(guān)蛋白Emx1抗體Porcine β-EPR (Beta-Endorphin Receptor) ELISA Kit
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