ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
Streptomyces│djakarnsis 雅加達(dá)鏈霉菌Streptomyces│djakarnsis分離基物:土壤/近海紅樹林土壤斜面培養(yǎng)物模式菌株:no可用于抗菌活性及抗腫瘤活性研究12生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Muricauda│sp. 鼠尾菌Muricauda│sp.分離基物:樣/表層海凍干物模式菌株:no潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群333生長條件:26℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Achromobacr│xylosoxidans 氧化木糖無色桿菌Achromobacr│xylosoxidans分離基物:樣/表層海凍干物模式菌株:no潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群333生長條件:26℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Alcanivorax│sp. 食烷菌Alcanivorax│sp.分離基物:樣/表層海凍干物模式菌株:no有機(jī)污染物降解菌/石油烴類降解菌472生長條件:26℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Alicycliphilus│denitrificans 脫氮嗜脂環(huán)物菌Alicycliphilus│denitrificans分離基物:沉積物/表層沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株:no潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自酚降解菌群33生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Alishewanella│aestuarii 潮汐別樣希瓦氏菌Alishewanella│aestuarii分離基物:沉積物/表層沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株:no潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自酚降解菌群33生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Pusillimonas│noermannii 羅氏單胞菌Pusillimonas│noermannii分離基物:沉積物/表層沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株:no潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自酚降解菌群33生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Bacillus│marisflavi 黃海芽孢桿菌Bacillus│marisflavi分離基物:沉積物/深海沉積物凍干物模式菌株:no潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群；用于表面活性劑745生長條件:26℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%
PY人吡啶交聯(lián)物ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理SEL1L  SEL1L抗體化木蘭花2 - 二苯基膦-2' - （N組，n -二基） - 聯(lián)苯Mouse AT (anti-Trypsin) ELISA Kit

Selenoprotein W  硒蛋白W抗體(-)-丁香樹脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷2 - 二苯基膦-2' - （N組，n -二基） - 聯(lián)苯Mouse aZP (anti-Zona Pellucida Antibody) ELISA Kit

Sema3A  臂板蛋白3A抗體 1,2-二烷標(biāo)準(zhǔn)品  號： 78-87-5 250mg乙(1S,2R)-2-[N-芐基-N-(苯基磺酰)氨基]-1-苯基酯[交叉反應(yīng)用試劑]Mouse ACF (Apobec 1 Complementation Factor) ELISA Kit

Sema3F  臂板蛋白3F抗體 1,3-二烯 標(biāo)準(zhǔn)品  號： 542-75-6 250mg乙(1R,2S)-2-[N-芐基-N-(苯基磺酰)氨基]-1-苯基酯[交叉反應(yīng)用試劑]Mouse APO-A1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit

Sema4C  臂板蛋白4C抗體 1-萘乙 86-87-3 1g(1R,2R,5R)-(+)-2-羥基-3-蒎Mouse ApoB (Apolipoprotein B) ELISA Kit  

Sema6A  Sema6A抗體  2-(1-萘)乙酰胺 標(biāo)準(zhǔn)品  號：86-86-2 1g(1R,2R,5R)-(+)-2-羥基-3-蒎Mouse APO-C1 (Apolipoprotein C1) ELISA Kit  

Sema7A/CD108  軸突生長因子CD108抗體2,2-DPA 茅草枯 標(biāo)準(zhǔn)品  號：75-99-0 250mg3-溴-1,8-萘二甲酐Mouse APO-C4 (Apolipoprotein C4) ELISA Kit  

SFRP1  分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體2,4,5-T 2，4，5-涕標(biāo)準(zhǔn)品  號： 93-76-5 250mg3-溴-1,8-萘二甲酐Mouse APO-E (Apolipoprotein E) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)