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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TCEF人癌胚鐵蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | CEF人癌胚鐵蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human Carcinoembryonic Ferritin, CEF Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63359 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
Lyophyllum│decass (Fr.) Singer 簇生離褶傘Lyophyllum│decass (Fr.) Singer分離基物:擔(dān)子果斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Lewia│infectoria (el) M.E. Barr & E.G. Simmons 侵染鏈格孢Lewia│infectoria (el) M.E. Barr & E.G. Simmons分離基物:馬鈴薯葉部斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Aciculosporium│take I. Miyake 竹針孢座囊菌Aciculosporium│take I. Miyake分離基物:竹叢枝頂端葉鞘斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Corynebacrium│sputi Yassin and Siering 棒狀桿菌屬Corynebacrium│sputi Yassin and Siering分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no2生長(zhǎng)條件:30存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:≥98%
Panellus│serotinus (Pers.) Kühner 亞側(cè)耳(元蘑)Panellus│serotinus (Pers.) Kühner斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法 純度:98%
Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer 金針菇(黃)Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法 純度:98%
Geotrichum│linkii Vörös-Felkai 蒜頭果白地霉Geotrichum│linkii Vörös-Felkai分離基物:蒜頭果種斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:98%
Gloeosporium│kaki S. Ito 柿炭疽病Gloeosporium│kaki S. Ito分離基物:枝條斜面培養(yǎng)物模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:98%
CEF人癌胚鐵蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理ADO 2-氨基乙硫雙加氧酶抗體山茱萸苷4,6-二甲基-2-胺(易)AQP4(aquaporin Protein-4) 水通道蛋白-4(抗原)
Integrin Alpha V 整合素αV抗體莫諾苷N-alpha-芴甲氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-D-色氨B7-H4 B7-H4(抗原)
ADRA2 ADRA2腎上腺素能受體2抗體(R型)人參皂苷Rg2N-alpha-芴甲氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-D-色氨BADH2 (Betaine-aldehyde dehydrogenase ) BADH2抗原
ADRB1 腎上腺素能受體β1抗體商陸皂苷甲3,4,5-三苯胺BGP(Bone Gla-protein) 骨鈣素(抗原)
ADRB2 腎上腺素能受體β2抗體商陸皂苷乙3,4,5-三苯胺BK channel (stretch-activated Kca channel) BK通道蛋白(抗原)
phospho-ADRB2(Ser346) 磷化腎上腺素能受體β2抗體商陸皂苷β-糖BKCa channels(calcium-activated potassium channel) 鈣激活鉀通道蛋白
ADRB3 β3-腎上腺素能受體抗體商陸皂苷丁(R)-4-Boc-2-甲基BTG2/TIS21(B-cell translocation gene 2) BTG2(抗原)
AE3/SLC4A3 陰離子交換蛋白3抗體商陸皂苷戊(R)-4-Boc-2-甲基C-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一種原癌基因)抗原
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