ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
Cochliobolus│australiensis (Tsuda & Ueyama) Alcorn 澳大利亞平臍蠕孢Cochliobolus│australiensis (Tsuda & Ueyama) Alcorn分離基物:狗牙根葉片斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:26存儲條件:定期移植法 純度：98%

Hypholoma│fasciculare var. fasciculare (Huds.) P. Kumm. 簇生黃韌傘Hypholoma│fasciculare var. fasciculare (Huds.) P. Kumm.分離基物:子實體斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：97%

Tricholoma│equestre var. equestre (L.) P. Kumm. 黃綠口蘑Tricholoma│equestre var. equestre (L.) P. Kumm.分離基物:子實體斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：97%

Xerula│radicata (Relhan) Dörfelt 長根奧德蘑Xerula│radicata (Relhan) Dörfelt分離基物:子實體斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：≥98%(HPLC)

Agaricus│bisporus (J.E. Lange) Imbach 雙孢蘑菇Agaricus│bisporus (J.E. Lange) Imbach斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：98%

Daedalea│dickinsii Yasuda 肉色迷孔菌Daedalea│dickinsii Yasuda分離基物:基質(zhì)斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：98%

Penicillium│thomii Maire 湯姆青霉Penicillium│thomii Maire分離基物:林區(qū)土壤斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：98%

Hygrocybe│helobia (Arnolds) Bon 粒紅濕傘Hygrocybe│helobia (Arnolds) Bon分離基物:厚莢相思枯枝斜面培養(yǎng)物150生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：98%
BJP人本周蛋白ELISA試劑盒實驗原理Adiponectin Receptor 1  脂聯(lián)素受體-1抗體麥冬皂苷A特立胺XAF1(XIAP-associated factor 1)  XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗原

Adiponectin receptor 2  脂聯(lián)素受體2抗體麥冬皂苷B(R)-1-苯基-1,2-乙二XRCC1(X-ray Repair Cross Complementing 1)  X射線修復(fù)交叉互補蛋白/基切除修復(fù)基因抗原

Adiponectin  脂聯(lián)素抗體麥冬皂苷C(R)-1-苯基-1,2-乙二ZO-1 peptide  胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗原

ADM/AM   腎上腺髓質(zhì)素抗體麥冬皂苷D'(R)-1-苯基-1,2-乙二Ag-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein)  ARC(多肽抗原)

ADM (ProAM-N20)  腎上腺髓質(zhì)素抗體(N端20肽)麥冬皂苷D'Methyl 3,5-diformyl-1-indolizinecarboxylateAngiotensin II receptor(Ang II )  血管緊張素Ⅱ受體(抗原)

ADM R  腎上腺髓質(zhì)素受體抗體甲基麥冬二氫高異黃A5--2-胺（易）Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC)  蛋白激酶C（多肽抗原）

ADNP/NAP  活性依賴的神經(jīng)保護肽抗體麥冬二氫高異黃A5--2-胺（易）Beta1-adrenergic receptor  腎上腺素能受體β1(抗原)

ADORA3  腺苷受體A3抗體山茱萸新苷4-氨基-嘧-5-Annexin V  膜粘連蛋白-5(抗原)
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)