當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>小鼠ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TANA小鼠抗核抗體ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | ANA小鼠抗核抗體ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Mouse Anti-nuclear Antibody, ANA Elisa Kit |
貨號 | FS-M64168 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
上皮型脂肪結(jié)合蛋白(FABP5) 規(guī)格:100mg 英文:Cav-1
上皮基質(zhì)相互作用蛋白1(EPSTI1) 規(guī)格:100mg 英文:KGF
上池蛋白(SBSN) 規(guī)格:100mg 英文:AR
白蛋白(PVALB) 規(guī)格:約0.1ml/支 英文:TAGLN
白蛋白(PVALB) 規(guī)格:0.1ml 英文:GFAP
亞基鈣蛋白酶1(CAPNS1) 規(guī)格:100mg 英文:GDNF
異二聚體伴侶(SHP) 規(guī)格:50mg 英文:GDNF
泛素相關(guān)修飾蛋白2(SUMO2) 規(guī)格:20mg 英文:Collectin
表皮粘蛋白(SBEM) 規(guī)格:600μIU 英文:CollagenaseII
蛋白α(PARVα) 規(guī)格:約10mg/支 英文:CollagenaseI
蛋白β(PARVβ) 規(guī)格:100mg 英文:HCBⅡ
蛋白γ(PARVγ) 規(guī)格:1g 英文:PYD
核糖核蛋白多肽C(SNRPC) 規(guī)格:100mg 英文:Adipsin
核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1) 規(guī)格:100mg 英文:DAF
核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1) 規(guī)格:20mg 英文:PCT
Magnoflorine螺內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) 分子式:C8H12N2 純度:98.0%
Calyxamine B卡馬西平 分子式:C14H15NO 純度:99.0%
N-Methyllindcarpine卡馬西平(標(biāo)準(zhǔn)品) 分子式:C9H10N2S 純度:98.0%
Triacetonamine hydrochloride卡鉑 分子式:C8H11N5O3 純度:99.0%
Aristolactam BIII卡鉑(標(biāo)準(zhǔn)品) 分子式:C7H7N3O 純度:99.0%
10-Hydroxyscandine長春新/醛基長春 分子式:C13H11NO 純度:99.0%
Proline長春新/醛基長春(標(biāo)準(zhǔn)品) 分子式:C8H13NO2 純度:98.0%
Aurantiamide帕唑帕尼 分子式:C11H13N3O 純度:99.0%
Buxbodine B非洛地平/非地平 分子式:C13H10ClNO 純度:99.0%
肼 Hydrazine sulfate 規(guī)格:50mg
地塞米松磷酯 Dexamethasone sodium phosphate 規(guī)格:200mg
4-甲氨基安替比林 4- Novalgin 規(guī)格:50mg
2,3-二甲基胺 2, 3- two methyl aniline 規(guī)格:100mg
丙磺舒 Probenecid 規(guī)格:100mg/支
乙二醇 Glycol 規(guī)格:100mg
可可 Theobromine 規(guī)格:50mg
山梨醇 Sorbitol 規(guī)格:50mg
普瑞巴林 Puri Balin 規(guī)格:100mg
硝奧昔康唑 Oxiconazole nitrate 規(guī)格:100mg
二二氮環(huán)已烷鉑 Two chloro two N cyclohexane platinum 規(guī)格:20mg
左旋奧沙利鉑(奧沙利鉑雜質(zhì)D) L oxaliplatin (impurity D) 規(guī)格:25mg
ANA小鼠抗核抗體ELISA試劑盒實驗原理磷化HER4抗體Porcine PLA2G12B (Phospholipase A2, Group XII B) ELISA Kit
轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體Porcine TREM-1 (Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells-1) ELISA Kit
磷化轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體Porcine MFI2 (Melanotransferrin) ELISA Kit
真核肽鏈釋放因子1抗體Porcine ACP5 (Tartrate Resistant Acid Phosphatase 5) ELISA Kit
真核肽鏈釋放因子3a抗體Porcine Thyronine ELISA Kit
表皮生長因子受體底物15抗體Porcine ADP/Acrp30 (Adiponectin) ELISA Kit
內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN1抗體Porcine AGRN (Agrin) ELISA Kit
內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN2抗體Porcine AP36 (Apelin 36) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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