ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
化樣蛋白11抗體（N端）Podoplanin Protein  平足蛋白抗原靈芝 B

大腸癌腫瘤突變蛋白抗體Pokemon (POK Erythroid Myeloid Ontogenic factor)  “撲克蒙”蛋白又稱(chēng)“波克曼”蛋白去勞丹堿鹽鹽,四氫堿鹽鹽

絲氨/蘇氨蛋白激酶MARK4抗體Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1)  多囊腎蛋白1抗原異夏佛塔苷

肽水解酶抗體Polycystin 2(polycystic kidney disease 2)  多囊腎蛋白2抗體氨酰膽堿；氯貝膽堿

磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide  磷化蛋白激酶B抗原（絲氨磷化位點(diǎn)：473）5-羥糠（標(biāo)準(zhǔn)品）

磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶3抗體RKIP(Raf kinase inhibitor protein)  Raf激酶抑制蛋白抗原茄尼（標(biāo)準(zhǔn)品）

絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體pre-X protein[Hepatitis B virus]N-Terminus  乙肝病pre-X蛋白抗原（N端）大波斯菊苷,芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)

磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體pre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus]  乙肝病pre-X蛋白抗原（C端）秦皮苷（標(biāo)準(zhǔn)品）

磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體PHD3 (Egln3; HIF-prolyl hydroxylase 3)  脯氨羥化酶(多肽)秦皮素（標(biāo)準(zhǔn)品）

磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體ADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 )  新型金屬質(zhì)蛋白酶(抗原)秦皮素

磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體Adiponectin  脂聯(lián)素（多肽片斷抗原）秦皮素（標(biāo)準(zhǔn)品）

遷移誘導(dǎo)因子5抗體Adipo R1(adiponectin receptor 1)  脂聯(lián)素受體-1(抗原)秦皮乙素（標(biāo)準(zhǔn)品）

致癌因抗體Adipo R2(adiponectin receptor 2)  脂聯(lián)素受體-2(抗原)秦皮乙素；6,7-二羥；七葉亭

絲裂原活化蛋白激酶MAP4K5抗體PSAP/PAP peptide  前列腺性磷酶抗原茄尼

MKLN1抗體PSAP/PAP peptide (human)  前列腺性磷酶抗原(人)(標(biāo)準(zhǔn)品)
增殖細(xì)胞核抗原抗體撫生ELISA試劑盒Anti-PLAC9 Antibody膜醭畢赤酵母拉丁屬名: Pichia membranifaciens

Anti-PLA2G6 Antibody嗜冷桿菌*用途: 在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)中以5mg/l的孔雀石綠為碳源，與1/6LB共代謝培養(yǎng)，2天內(nèi)孔雀石綠降解率大于60%

Anti-PLAT Antibody白色短波單胞菌拉丁屬名: Brevundimonas  alba

Anti-PLAU Antibody假單胞菌用途: 可耐受高濃度對(duì)硝酚，降解對(duì)硝酚，降解率達(dá)30%-50%。

Anti-PLAT Antibody蠟樣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  cereus

Anti-PLAT Antibody擬莖點(diǎn)霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

Anti-PLAUR Antibody白僵菌用途: 害蟲(chóng)生物防治

Anti-PLAUR Antibody褐孢大禿馬勃拉丁屬名: Lycoperdon excipuliforme

Anti-PLAUR Antibody多根硬皮馬勃注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

Anti-PLCB1 Antibody大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Escherichia  coli
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)