實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

PCR技術(shù)的定量原理：
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于液中。
PCR檢測(cè)試劑盒：
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
納士維爾鏈霉菌生長(zhǎng)條件: 30℃培養(yǎng)基: 329提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法

白色小環(huán)柄菇菌模式菌株: no子實(shí)體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25

阿魏側(cè)耳培養(yǎng)基: 14栽培農(nóng)藝性狀研究提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25℃ 真空冷凍干燥法

 -866℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

 F110,60055Kauffmann血清型　31　1模式菌株: no種屬: Proteus│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃

銅綠假單胞菌生長(zhǎng)條件: 36℃模式菌株: no痰提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2 -80℃冰箱凍結(jié)法

CCTCCAB206139=DSM18752模式菌株: yes安全等級(jí): 1種屬: Zunongwangia│profunda沉積物/柱狀樣（-2m）提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株；培養(yǎng)基: 472

南海海棲菌1.生物降解；2.生物催化；3.生物活性物質(zhì)篩選； 4.海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。模式菌株: no水樣/表層海水提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 1001生長(zhǎng)條件: 25℃

 AS3.972醬油、腐乳模式菌株: no種屬: Monascus│anka提供形式: 斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 17生長(zhǎng)條件: 28℃

假交替單胞菌1、海洋石油污染生物修復(fù)； 2、生物活性物質(zhì)篩選。模式菌株: no沉積物/土灰色沉積物10-12cm提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 28℃

 -867℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

銅綠假單胞菌生長(zhǎng)條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0002提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

球孢白僵菌培養(yǎng)基: CM0014模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 26C 真空冷凍干燥

大腸埃希氏菌培養(yǎng)基: 0032遺傳工程提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 37℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

 14培養(yǎng)基: CM0121模式菌株: no種屬: Clostridium│tetani提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2生長(zhǎng)條件: 37℃ 真空冷凍干燥法

黑曲霉培養(yǎng)基: CM0855甘蔗糖蜜淺盤發(fā)酵產(chǎn)檸檬。提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法

偶氮二咪唑啉基丙烷  根皮素  (4-脒基)甲磺酰鹽鹽

4--2-鹽鹽  2-巰基-1-甲基咪唑  噁喹

3,4-二溴  茶堿  3-羥基-2,4,6-三(HTBA)

四氫異  雙嘧達(dá)莫  螺[1,3,3-基吲哚-(6'-硝基并二氫)]

Sodium thiocyanate  鈉  540-72-7

Potassium thiocyanate  鉀  333-20-0

2-Nitroanisole  2-硝基甲醚  91-23-6

2-Chloroanisole  2-甲醚  766-51-8

大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)ELISA試劑盒 ，英文名： ITG αM/CD11b ELISA Kit

人類風(fēng)濕因子(RF)ELISA檢測(cè)試劑盒Humaheumatoidfactor,RFELISAKit 96T/48T

大鼠白三烯C4(LTC4)免疫試劑盒 Rat Leukoiene C4,LT-C4 ELISA Kit

CLIAKitfoHAA(Humahyroidhormoneaoaibodies)ELISAKit人甲狀腺非肽激素抗體規(guī)格：48T/96T

全組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位染色試劑盒10次

ELISAKitTA人抗磷壁抗體規(guī)格：48T/96T
轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸檢測(cè)試劑盒靛藍(lán)482-89-3中文別名：靛蘭,還原藍(lán)  

英文名：Indigo  

登錄號(hào)：482-89-3

分子式：C16H10O2N2

分子量：262.26

分子結(jié)構(gòu)：

外觀：藍(lán)色粉末

規(guī)格：20mg/支

純度：≥ 98%

用途：用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。

提取來源：靛藍(lán)。

溶解性：微溶于水、乙醇、甘油和丙二醇，不溶于油脂。

熔點(diǎn)：390-392℃

藥理藥效：用于食品、醫(yī)藥和日用化妝品的著色。食用靛藍(lán)為食用合成色素。

貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年