PLC磷脂酶C檢測(cè)試劑盒微量法-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	FS-01S63539

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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過(guò)產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱(chēng)：PLC磷脂酶C檢測(cè)試劑盒微量法
規(guī)格：100管/96樣

檢測(cè)方法：微量法

貨號(hào)：FS-01S63539
商品介紹：

測(cè)定意義

磷脂酶C（EC 3.1.4.3）是一種水解甘油磷酸酯C3位點(diǎn)甘油磷酸酯鍵的脂類(lèi)水解酶，廣泛存在于微生物及動(dòng)植物的組織和細(xì)胞中，在細(xì)胞代謝、細(xì)胞傳遞、生長(zhǎng)發(fā)育等方面具有重要作用。

測(cè)定原理

磷脂酶C催化水解NPPC產(chǎn)生對(duì)硝基，在410nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、微量石英比色皿、恒溫水浴鍋。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
基質(zhì)衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)聯(lián)免疫試劑盒大腸埃希氏PABP2 (D6F3Q) Rabbit mAb

基質(zhì)衍生因子4(SDF-4)聯(lián)免疫試劑盒VPI 6883 布氏瘤胃球Bak (D4E4) Rabbit mAb (PE Conjugate)

畸胎瘤衍生生長(zhǎng)因子1(TDGF1)聯(lián)免疫試劑盒雙孢蘑菇EAF2 (E1R8C) Rabbit mAb

1β- d-呋喃糖苷基咪唑-4-甲酰(AICAR)聯(lián)免疫試劑盒球孢白僵MUC1 (D9O8K) XP® Rabbit mAb

激肽釋放8(KLK8)聯(lián)免疫試劑盒鹽古桿MUC1 (D9O8K) XP® Rabbit mAb

低密度脂蛋白受體(VLDLR)聯(lián)免疫試劑盒枯草芽孢桿HMGB2 (D1P9V) Rabbit mAb

半乳凝集3(GAL3)聯(lián)免疫試劑盒枯草芽胞桿HMGB2 (D1P9V) Rabbit mAb

喋呤(MTX)聯(lián)免疫試劑盒干酪乳桿Hematoxylin

甲基化(Methylase)聯(lián)免疫試劑盒煙曲霉Coilin (D2L3J) XP® Rabbit mAb

甲肟前列腺D2(PGD2-MOX)聯(lián)免疫試劑盒耐輻射奇球Coilin (D2L3J) XP® Rabbit mAb

甲酰肽受體2(FPR2)聯(lián)免疫試劑盒橢孢小隔指孢Phospho-FoxM1 (Ser35) Antibody

甲狀旁腺(PTH)聯(lián)免疫試劑盒蠶豆葡萄孢PNUTS Antibody

甲狀旁腺受體2(PTHR2)聯(lián)免疫試劑盒肉色諾卡氏CDK2 (78B2) Rabbit mAb (PE Conjugate)

甲狀旁腺相關(guān)蛋白(PTHrP)聯(lián)免疫試劑盒弗氏檸檬桿ADAR1 (D7E2M) Rabbit mAb

三肽基肽I(TPP1)聯(lián)免疫試劑盒枯草芽胞桿168SignalStain® Mounting Medium
PLC磷脂酶C檢測(cè)試劑盒微量法周期蛋白依賴(lài)性激抑制劑2D抗體Human MASP2(Mannan-binding lectin serine protease 2) ELISA Kit人脊髓灰質(zhì)炎病IgG（PV-IgG）ELISA試劑盒,PV-IgG ELISA

膽24S－羥化Human APLN(Apelin) ELISA Kit人促生長(zhǎng)釋放（GHRH）ELISA試劑盒,GHRH ELISA

豬瘟病抗體Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA Kit人脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2（LCN2）ELISA試劑盒,LCN2 ELISA

色c氧化亞型2抗體Human ITGB1(Integrin beta-1) ELISA Kit人葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白（GKRP）ELISA試劑盒,GKRP ELISA

周期G2抗體Human MEP1A(Meprin A subunit alpha) ELISA Kit人尿苷二磷葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移（UGCG）ELISA試劑盒,UGCG ELISA

銅藍(lán)蛋白抗體Human BMX(Cytoplasmic tyrosine-protein kinase BMX) ELISA Kit人磷酯Cγ鏈（PLCγ1）ELISA試劑盒,

CUE結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體Human SOD2(Superoxide dismutase [Mn], mitochondrial) ELISA Kit人艾杜糖硫酯（IDS）ELISA試劑盒,

線(xiàn)粒體復(fù)合物NDUFS1蛋白抗體Human LPCAT2(Lysophosphatidylcholine acyltransferase 2) ELISA Kit人遲現(xiàn)抗原4（VLA4）ELISA試劑盒,

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