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樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。?
產(chǎn)品名:醌NADH脫氫酶1(NQO1)檢測試劑盒
英文名:NQO1 ELISA Kit
貨號:FS-E64713
醌NADH脫氫酶1(NQO1)檢測試劑盒 英文名稱:NQO1 ELISA Kit 產(chǎn)品別名:小鼠醌NADH脫氫酶1(NQO1)ELISA試劑盒批發(fā)價,小鼠醌NADH脫氫酶1(NQO1)ELISA試劑盒廠價用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本
服務(wù):可提供免費代測服務(wù),以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導(dǎo)等
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等
保存環(huán)境:2-8℃低溫、避光、防潮
產(chǎn)品優(yōu)勢:ELISA試劑為我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行,并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
注意事項
1)試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9)按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
Rhizopus arrhizus var. rouxii 中文名稱:魯氏少根根霉Rhizopus arrhizus var. rouxii分離基物:酒曲提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:接合菌門真菌,產(chǎn)糖化酶 根霉酒曲培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:25℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Prevola│melaninogenica 中文名稱:產(chǎn)黑普雷沃氏菌Prevola│melaninogenica分離基物:唾液提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:860生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%
Mycogelidium│sinense 中文名稱:中華石花菌Mycogelidium│sinense分離基物:子實體組織提供形式:斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:食用菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:17生長條件:20℃存儲條件:定期移植法 純度:98%
Trichophyton rubrum 中文名稱:紅色毛癬菌Trichophyton rubrum安全等級:1模式菌株:未知培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:28℃,好氧 純度:98%
Lactobacillus│ 中文名稱:乳桿菌Lactobacillus│分離基物:健康孕婦分泌物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0006生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:98%
Bacillus pseudofirmus 中文名稱:假堅強芽孢桿菌(暫無)Bacillus pseudofirmus提供形式:凍干物/斜面安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:性彈性蛋白酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:培養(yǎng)基:成分:大豆蛋白胨 5.0 g,酵母提取物 5.0 g,葡萄糖 10.0 g,K2HPO4 1.0 g,MgSO4·7H2O 0.2 g,NaCl 5.0 g,Na2CO3(單獨滅菌)10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L。121℃,15分鐘滅菌。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件:37℃,好氧。生長特性革蘭氏陽性細菌,形成芽孢。存儲條件:2-8℃冷藏,凍干管10年以上,斜面1-3個月。 純度:98%
Dyella│sp. 中文名稱:戴氏菌Dyella│sp.分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:土壤微生物學研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:451生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%
Bordela pertussis 中文名稱:百日咳鮑特菌Bordela pertussis提供形式:凍干安全等級:2模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:哥倫比亞血平板生長條件:37℃,好氧,48h 純度:98%
醌NADH脫氫酶1(NQO1)檢測試劑盒Mcl1 髓樣白血病-1抗體甘氨1,2-十四碳二Human ERCC1 (Excision Repair Cross Complementing Rodent Repair Deficiency Complementation 1) ELISA Kit
Phospho-Mcl1 (Ser159/Thr163) 磷化髓樣白血病-1抗體L-谷氨1,2-十四碳二Human HJV/HFE2 (Hemojuvelin/Hemochromatosis Type 2) ELISA Kit
M2 雙微體2癌基因抗體門冬氨2-聯(lián)苯Human KLK1 (Kallikrein 1) ELISA Kit
Phospho-M2 (Ser166) 磷化雙微體2癌基因抗體云芝胞內(nèi)糖肽2-聯(lián)苯Human LXRα (Liver X Receptor Alpha) ELISA Kit
R1/p-GP/CD243 多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體鹽組氨3-溴聯(lián)苯Human dDAVP (1-Desamino-8D-Arginine Vasopressin) ELISA Kit
MEF2A 肌增強因子2抗體腦蛋白水解物3-溴聯(lián)苯Human HSPβ6/HSP-20 (Heat Shock Protein Beta 6) ELISA Kit
Phospho-MEF2A (Thr312) 磷化肌增強因子2抗體舍雷肽酶3-溴聯(lián)苯Human HSP-27/HSPB1 (Heat Shock Protein 27) ELISA Kit
Phospho-MEF2A (Ser408) 磷化肌增強因子2抗體甘精胰島素1,5-萘二磺,四水Human HSP-40 (Heat Shock Protein 40) ELISA Kit
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