當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TADP人脂聯(lián)素ELISA試劑盒實驗原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | ADP人脂聯(lián)素ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human adiponectin, ADP Elisa Kit |
貨號 | FS-H63782 |
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務!
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
Bacillus│timonensis 芽胞桿菌(加詞待譯)Bacillus│timonensis分離基物:樣/養(yǎng)豬場沼氣池沼液斜面培養(yǎng)物模式菌株:no潛在的生物轉(zhuǎn)化微生物/未經(jīng)過單菌驗證的反硝化菌33生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Bacillus│cohnii 科氏芽胞桿菌Bacillus│cohnii分離基物:沉積物/TVG表層沉積物凍干物模式菌株:no潛在的有機污染物降解菌/分離自十溴聯(lián)醚富集菌群471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Erythrobacr│vulgaris 普通赤桿菌Erythrobacr│vulgaris分離基物:沉積物/硫化物凍干物安全等級:1模式菌株:no471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Brachybacrium│sacelli 教堂短桿菌Brachybacrium│sacelli分離基物:沉積物/箱式樣品凍干物安全等級:1模式菌株:no海洋放線菌471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Lentibacillus│sp. 慢生芽孢桿菌Lentibacillus│sp.分離基物:沉積物/重力活塞取樣凍干物模式菌株:no潛在的新種471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Aquimarina│spongiae 海綿海桿菌Aquimarina│spongiae分離基物:生物樣/海綿斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:471生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Aquimarina│gracilis 海桿菌(加詞待譯)Aquimarina│gracilis分離基物:生物樣/貽貝腸道內(nèi)容物斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Pseudochrobactrum│kiredjianiae 克氏假蒼白桿菌Pseudochrobactrum│kiredjianiae分離基物:沉積物/表層沉積物凍干物安全等級:1模式菌株:no潛在的無機污染物抗性菌/分離自Cr富集菌群1001生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%,含0.1 % 對二酚 穩(wěn)定劑
ADP人脂聯(lián)素ELISA試劑盒實驗原理Phospho-MYPT1 (Thr696) 磷化肌球蛋白磷酶抗體血管生成素相關(guān)蛋白6抗體5--2-(基)苯酚Mouse CCB (Calcium Channel Blockers) ELISA Kit
Phospho-MYPT1 (Thr853) 磷化肌球蛋白磷酶抗體Muellerian繆勒管激素抑制因子抗體阿糖腺苷一水合物Mouse CaSR (Calcium Sensing Receptor) ELISA Kit
SM22 Alpha 骨架相關(guān)蛋白抗體酪氨蛋白激酶受體A8抗體4-氨基-7-(基)喹啉Mouse CACYBP (Calcyclin Binding Protein) ELISA Kit
Smoothened/SMOH 跨膜蛋白Smoothened抗體脂肪酰輔酶A家族成員1抗體4-氨基-7-(基)喹啉Mouse CIAP (Calf Intestinal Alkaline Phosphatase) ELISA Kit
Regucalcin/SMP30 衰老標記蛋白30抗體芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體十二Mouse CNX (Calnexin) ELISA Kit
Snake poison Protein 蛇蛋白抗體(蝮蛇)磷化芳香胺N-乙?;D(zhuǎn)移酶抗體十二Mouse T (Calpastatin) ELISA Kit
Snake poison Protein 蛇蛋白抗體(中華眼鏡蛇)肌動蛋白結(jié)合蛋白1抗體苯頻哪酯Mouse CRT (Calreticulin) ELISA Kit
SNAP-25 突觸相關(guān)蛋白25抗體粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體苯頻哪酯Mouse CR (Calretinin) ELISA Kit
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