當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TBMP-7人骨成型蛋白7ELISA試劑盒實驗原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | BMP-7人骨成型蛋白7ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Bone morphogenetic protein 7, BMP-7 Elisa Kit |
貨號 | FS-H63776 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準
Achromobacr│ruhlandii 拉氏無色桿菌Achromobacr│ruhlandii分離基物:樣/污油處理池污凍干物模式菌株:no有機污染物降解菌/石油,柴油等烷烴類物質(zhì)降解菌33生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Kluyvera│georgiana 佐治亞克呂沃爾氏菌Kluyvera│georgiana分離基物:生物樣/野生鯔魚腸道內(nèi)容物凍干物模式菌株:no共生微生物/野生鯔魚腸道共生菌33生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Zobellella│denitrificans 脫氮卓貝爾氏菌Zobellella│denitrificans分離基物:沉積物/沉積物凍干物安全等級:1模式菌株:471生長條件:30-35℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Bowmanella│denitrificans 脫氮鮑曼氏菌Bowmanella│denitrificans分離基物:樣/表層海凍干物安全等級:1模式菌株:471生長條件:30-35℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Shewanella│baltica 波羅的海希瓦氏菌Shewanella│baltica分離基物:生物樣/比目魚腸道內(nèi)容物斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no共生微生物/比目魚腸道共生菌 產(chǎn)酶微生物/蛋白酶33生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Corynebacrium│variabile 變異棒桿菌Corynebacrium│variabile分離基物:生物樣/比目魚腸道內(nèi)容物凍干物模式菌株:no共生微生物/比目魚腸道共生菌 產(chǎn)酶微生物/脂酶(三丁甘油酯)33生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95%
Bacillus│hwajinpoensis 花津浦芽孢桿菌Bacillus│hwajinpoensis分離基物:生物樣/野生鯔魚腸道內(nèi)容物凍干物模式菌株:no共生微生物/野生鯔魚腸道共生菌33生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95%
Bacillus│xiamenensis 廈門芽胞桿菌Bacillus│xiamenensis分離基物:生物樣/野生鯔魚腸道內(nèi)容物凍干物模式菌株:;共生微生物/野生鯔魚腸道共生菌;產(chǎn)酶微生物/淀酶、蛋白酶、脂酶(三丁甘油酯);已測全基因組草圖(賴)33生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥99%
BMP-7人骨成型蛋白7ELISA試劑盒實驗原理SLC6A19 依賴鈉鈣交換蛋白6乙酰輔酶A羧化酶抗體5-氨基煙Mouse BTC (Betacellulin) ELISA Kit
SLC16A3/MCT-4 MCT4抗體磷化乙酰輔酶A羧化酶抗體5-氨基煙Mouse BACE1 (Beta Site APP Cleaving Enzyme 1) ELISA Kit
Smac/DIABLO 線粒體促凋亡蛋白抗體磷化Ack1抗體5-氨基煙Mouse β-EPR (Beta-Endorphin Receptor) ELISA Kit
SLC33A1 乙酰輔酶A轉(zhuǎn)運蛋白1抗體磷化腺苷單磷活化蛋白激酶α1抗體5-氨基吡-2-羧Mouse β-EP (Beta-Endorphin) ELISA Kit
SLC34A2 磷鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白抗體磷化腺苷單磷活化蛋白激酶β1抗體5-氨基吡-2-羧Mouse BID (BH3 Interacting Domain Death Agonist) ELISA Kit
SMN1 運動神經(jīng)元生存蛋白1抗體磷化間變型淋巴瘤激酶抗體L-4-溴苯氨Mouse IL-25 (Interleukin 25) ELISA Kit
Slit2/Slil3 神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體磷化毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體L-4-溴苯氨Mouse BTA (Bladder Tumor Antigen) ELISA Kit
SLT/SLT-IIe/O139 豬水腫素(O139)菌體蛋白抗體磷化三磷腺檸檬裂解酶抗體L-4-溴苯氨Mouse BLC (B-Lymphocyte Chemoattractant) ELISA Kit
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