ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
髓磷酯髓鞘蛋白1抗體MSLN(mesothelin)  間皮素(多肽抗原)柴胡皂苷B1（標(biāo)準(zhǔn)品）

巨噬克隆激因子抗體MSH2 (mutS homolog 2)  MSH2抗原苷松新酮（標(biāo)準(zhǔn)品）

膜相關(guān)環(huán)指蛋白4抗體NKR(Neuromedin B Receptor)  神經(jīng)激肽B受體（抗原）白花前胡乙素（標(biāo)準(zhǔn)品）

肌球蛋白輕鏈激酶抗體NF-L(Neurofilament triplet L)  低分子量神經(jīng)絲蛋白（抗原）白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ；蒼術(shù)內(nèi)酯II（標(biāo)準(zhǔn)品）

單紡錘體蛋白激酶1抗體NF-M (Neurofilament triplet M)  中分子量神經(jīng)絲蛋白（抗原）蟾靈;蟾酥靈（標(biāo)準(zhǔn)品)

有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2抗體NF-H(Neurofilament triplet H)  高分子量神經(jīng)絲蛋白(抗原)斷血流皂苷A（標(biāo)準(zhǔn)品）

單氧化酶B抗體NIS(Na+/I-symporter;NIS)  鈉轉(zhuǎn)運體蛋白（多肽抗原）三白草酮（標(biāo)準(zhǔn)品）

微小染色體維持缺陷蛋白4抗體NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB)  核因子或稱k因結(jié)合核因子(多肽抗原)大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）

自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體NR2A (Glutamate receptor2A)  谷氨受體（N端抗原）異蓮心堿（標(biāo)準(zhǔn)品）

髓鞘因調(diào)控因子抗體NRP-1(neuropilin-1)  神經(jīng)纖毛蛋白-1(抗原)蓮心堿高氯鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）

肌球蛋白結(jié)合蛋白C抗體NRP-2(neuropilin-2)  神經(jīng)纖毛蛋白-2（抗原）酞（標(biāo)準(zhǔn)品）

磷化絲裂原活化蛋白激酶磷酶1抗體NSBP1(Nucleosome-binding protein 1)  核小體結(jié)合蛋白1(抗原)茯苓（標(biāo)準(zhǔn)品）

促代謝型谷氨受體2抗體NTP，Neurual thread protein  神經(jīng)絲蛋白（抗原）(-)-丁香樹脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）

代謝型谷氨受體-3抗體OAT-1 (Organic anion transporter 1)human  陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1(人源）柯里拉京（標(biāo)準(zhǔn)品）

巨噬炎癥蛋白2（ GRＯβ）抗體OAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat  陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1（大、小鼠同源：人源見bs-0606P）人參皂苷F3（標(biāo)準(zhǔn)品）
脂聯(lián)素受體1ELISA試劑盒免費代測Anti-PTCH1 Antibody卷柄根霉拉丁屬名: Rhizopus circinans

Anti-PTCH2 Antibody非洲馬瘟?。↖I型）注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

Anti-PTCH2 Antibody托姆青霉拉丁屬名: Penicillium thomii

Anti-PTEN Antibody綠色木霉拉丁屬名: Trichoderma  viride

Anti-PTCRA Antibody特臘帕尼鹽紅菌拉丁屬名: Halorubrum trapanicum

Anti-PTEN Antibody茶樹菇注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

Anti-PTF1A Antibody綠木霉拉丁屬名: Trichoderma virens

Anti-PTGER1 Antibody托姆青霉拉丁屬名: Penicillium thomii

Anti-PTGER2 Antibody松口蘑拉丁屬名: Tricholoma matsutake

Anti-PTGER4 Antibody蒙氏假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas monteilii
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)