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人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;TE671 Subline No.2
貨號(hào) | AXB9937 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類(lèi)或動(dòng)物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人腎癌細(xì)胞; SW839 (STR) | 貨號(hào) | AXB9937 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | SW839:SW839 |
分類(lèi) | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹:
生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | 凍存條件 |
凍存液 | :55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | 培養(yǎng)條件 |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來(lái)凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來(lái)凍存的細(xì)胞開(kāi)始時(shí)方法和平時(shí)一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬(wàn) 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過(guò)度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過(guò)夜(如果沒(méi)有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過(guò)大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時(shí),吸除無(wú)血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過(guò)表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
PF/PFP(Rat Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit 大鼠穿孔素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Bcr/CD3D/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠T淋巴細(xì)胞受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ERM/Etv5 轉(zhuǎn)錄因子Ets差異基因5抗體 規(guī)格 0.2ml
Plant Vitamin E,VE EELISA Kit 植物E 96T
Midnolin 英文名稱(chēng): 中腦核仁蛋白抗體 0.1ml
AER61 英文名稱(chēng): 未知糖基化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體 0.2ml
Anti-Bcr/CD3D/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠T淋巴細(xì)胞受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
M2-PK(Mouse Pyruvate Kinase) ELISA Kit 小鼠酸激酶M2型同工酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD58/LFA-3/FITC 熒光素標(biāo)記淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DPY19L1 短粗矮胖19蛋白樣1抗體 規(guī)格 0.2ml
RV IgM 風(fēng)疹胞病毒 IgM(捕獲法二步法)
Midkine 英文名稱(chēng): 中期因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子抗體 0.1ml
Annexin A7 英文名稱(chēng): 膜粘連蛋白7抗體 0.1ml
Anti-CD58/LFA-3/FITC 熒光素標(biāo)記淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse single stranded DNA Antibody,ssDNA ELISA Kit 小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-BFGF/FITC 熒光素標(biāo)記堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ERCC1 DNA切除修復(fù)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
Plant Vitamin B12,VB12 ELISA Kit 植物B12 96T
MID2/RNF60/Midline-2 英文名稱(chēng): 環(huán)指蛋白60抗體 0.2ml
AKIRIN2 英文名稱(chēng): AKIRIN2蛋白抗體 0.2ml
Anti-BFGF/FITC 熒光素標(biāo)記堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
OMgp-Ab ELISA Kit 小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-BLNK(p-Tyr96) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人0酸化T淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EPHX2 胞漿環(huán)氧化物水解酶抗體 規(guī)格 0.2ml
sEPCR (Rabbit soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體 96T
MICS1 英文名稱(chēng): 生長(zhǎng)激素誘導(dǎo)跨膜蛋白抗體(真皮源性蛋白2) 0.2ml
Apo-1 英文名稱(chēng): 載脂蛋白1抗體 0.1ml
Anti-Phospho-BLNK(p-Tyr96) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人0酸化T淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TRH ELISA Kit 大鼠促甲狀腺素釋放激素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ACEI/FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Fibrillarin 核仁纖維蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Beta) ELISA kit 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β 96T
Microsporidia protien 英文名稱(chēng): 蜜蜂微孢子蟲(chóng)蛋白抗體 1ml
AQP3 英文名稱(chēng): 水通道蛋白-3抗體 0.1ml
Anti-ACEI/FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人腎癌細(xì)胞; SW839 (STR)iNOS(Mouse inducible nitric oxide synthase) ELISA Kit 小鼠誘導(dǎo)型合成酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ICAM-2/CD102 /FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞間粘附分子-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-rabbit IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml
CEA 癌胚抗原定量 96T
Microcephalin 1/BRIT1 英文名稱(chēng): 小腦癥基因1/認(rèn)知相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
ABCF3 英文名稱(chēng): 三0酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白F亞基3抗體 0.2ml
Anti-ICAM-2/CD102 /FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞間粘附分子-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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