商品介紹：

細胞凍存注意事項：
(1)  細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數(shù)量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2)  保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3)  細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4)  儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。

公司正在出售的產(chǎn)品：

HSP-90(Mouse Heat Shock Protein 90) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白90Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CD107a/LAMP-1/PE 熒光素PE標記溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Donkey Anti-rabbit IgG/FITC FITC標記的驢抗兔IgG 規(guī)格 0.3ml

Anti-TG 甲狀腺球蛋白抗體(TG抗體) 96T

MCG10 英文名稱： RNA相關(guān)結(jié)合蛋白MCG10抗體 0.2ml

ABHD13 英文名稱： 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白13抗體 0.2ml

Anti-CD107a/LAMP-1/PE 熒光素PE標記溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

GP210(Mouse Anti-glucoprotein 210)ELISA Kit 小鼠抗核膜糖蛋白210抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Caspase-6 (CT)/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(C端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ELYS 轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

ADAM9 ELISA Kit 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9 96T

MCC 英文名稱： 大腸癌突變蛋白抗體 0.2ml

phospho-AKT1(Ser129) 英文名稱： 0酸化蛋白激酶B抗體 0.1ml

Anti-Caspase-6 (CT)/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(C端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

AFP-L1 ELISA Kit 小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-BKCa channels/FITC 熒光素標記鈣激活通道蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Eppin 附睪蛋白酶抑制蛋白 規(guī)格 0.2ml

PF/PFP(Human Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit 人穿孔素/成孔蛋白 96T

MC5 Receptor 英文名稱： 黑素皮質(zhì)素受體5抗體 0.2ml

ABCA7 英文名稱： 三0酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白7抗體 0.2ml

大鼠骨髓瘤細胞；IR983FAnti-BKCa channels/FITC 熒光素標記鈣激活通道蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

MHB ELISA Kit 小鼠高鐵血紅蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Bmi1/PCGF4/FITC 熒光素標記組蛋白相關(guān)Bmi1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh EPOR 紅細胞生成素受體抗體 規(guī)格 0.1ml

Plant calmodulin,CAM ELISA Kit 植物鈣調(diào)素 96T

MC4 Receptor 英文名稱： 黑素皮質(zhì)素4受體抗體 0.1ml

AKD1 英文名稱： 腺苷酸激酶結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml

Anti-Bmi1/PCGF4/FITC 熒光素標記組蛋白相關(guān)Bmi1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

操作步驟:

(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。

(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)

A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。

B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。

分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉(zhuǎn)染準備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。

(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。

(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。

公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。