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貨號 | AXB10415 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細胞形態(tài) | 腹水細胞 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠艾氏腹水癌細胞;EAC | 貨號 | AXB10415 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | EAC:EAC |
分類 | 小鼠細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹:
生長特性 | 懸浮細胞 |
細胞形態(tài) | 腹水細胞 |
詳情 | EAC細胞是由武漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院胡遠揚教授提交保藏。EAC細胞廣泛用于制備小鼠腹水癌動物模型,研究抗腫瘤藥物的機制或篩選抗腫瘤藥物。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1×10^5-1×10^6個/mL |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態(tài)好,細胞數(shù)量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
IL-2R(Mouse Interleukin-2 receptor) ELISA kit 小鼠白介素2受體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Caspase-9/FITC 熒光素標(biāo)記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELL3 神經(jīng)生長因子調(diào)控抑制蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Mouse Anti-nuclear Antibody,ANA ELISA Kit 小鼠抗核抗體 96T
MCM3 英文名稱: 染色體維持缺陷蛋白3抗體 0.1ml
phospho-AQP2(Ser264) 英文名稱: 0酸化水通道蛋白2抗體 0.1ml
Anti-Caspase-9/FITC 熒光素標(biāo)記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ADM(Mouse adrenomedullin) ELISA Kit 小鼠腎上腺髓質(zhì)素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Caspase-9/FITC 熒光素標(biāo)記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELL2 聚合酶延伸因子2抗體 規(guī)格 0.2ml
LTD4(Human leukotriene D4) ELISA Kit 人白三烯D4 96T
MCM2 英文名稱: 染色體維持缺陷蛋白2抗體 0.1ml
Amphiregulin 英文名稱: 雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細胞源性生長因子)抗體 0.1ml
Anti-Caspase-9/FITC 熒光素標(biāo)記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
OFQ/N(Mouse orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit 小鼠孤腓肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CACNA1G/Cav3.1 /FITC 熒光素標(biāo)記電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EGR3 早期生長反應(yīng)蛋白3抗體 規(guī)格 0.1ml
LH (Rabbit luteotropic hormone) ELISA Kit 兔子促黃體激素 96T
MCL1 英文名稱: 髓樣細胞白血病-1抗體 0.1ml
APC 英文名稱: 腺瘤樣息肉抗體 0.1ml
Anti-CACNA1G/Cav3.1 /FITC 熒光素標(biāo)記電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
AMA ELISA Kit 大鼠抗心肌抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ATRN/FITC 熒光素標(biāo)記吸引素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FABP4 脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白 規(guī)格 0.1ml
小鼠艾氏腹水癌細胞;EACLZM(Mouse Lysozyme) ELISA Kit 小鼠 96T
MCK10 英文名稱: 神經(jīng)上皮酪酸激酶/癌激酶10抗體 0.1ml
phospho-Amyloid Precursor Protein (Tyr757) 英文名稱: 0酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體 0.1ml
Anti-ATRN/FITC 熒光素標(biāo)記吸引素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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