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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞系>>小鼠細(xì)胞系>> 小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞;EAC
貨號(hào) | AXB10415 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細(xì)胞形態(tài) | 腹水細(xì)胞 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類(lèi)或動(dòng)物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞;EAC | 貨號(hào) | AXB10415 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | EAC:EAC |
分類(lèi) | 小鼠細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹:
生長(zhǎng)特性 | 懸浮細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 腹水細(xì)胞 |
詳情 | EAC細(xì)胞是由武漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院胡遠(yuǎn)揚(yáng)教授提交保藏。EAC細(xì)胞廣泛用于制備小鼠腹水癌動(dòng)物模型,研究抗腫瘤藥物的機(jī)制或篩選抗腫瘤藥物。 |
生物安全等級(jí) | 1 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1×10^5-1×10^6個(gè)/mL |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來(lái)凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿(mǎn) 90% 的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來(lái)凍存的細(xì)胞開(kāi)始時(shí)方法和平時(shí)一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬(wàn) 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過(guò)度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過(guò)夜(如果沒(méi)有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過(guò)大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時(shí),吸除無(wú)血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過(guò)表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
IL-2R(Mouse Interleukin-2 receptor) ELISA kit 小鼠白介素2受體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Caspase-9/FITC 熒光素標(biāo)記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELL3 神經(jīng)生長(zhǎng)因子調(diào)控抑制蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Mouse Anti-nuclear Antibody,ANA ELISA Kit 小鼠抗核抗體 96T
MCM3 英文名稱(chēng): 染色體維持缺陷蛋白3抗體 0.1ml
phospho-AQP2(Ser264) 英文名稱(chēng): 0酸化水通道蛋白2抗體 0.1ml
Anti-Caspase-9/FITC 熒光素標(biāo)記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ADM(Mouse adrenomedullin) ELISA Kit 小鼠腎上腺髓質(zhì)素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Caspase-9/FITC 熒光素標(biāo)記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELL2 聚合酶延伸因子2抗體 規(guī)格 0.2ml
LTD4(Human leukotriene D4) ELISA Kit 人白三烯D4 96T
MCM2 英文名稱(chēng): 染色體維持缺陷蛋白2抗體 0.1ml
Amphiregulin 英文名稱(chēng): 雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長(zhǎng)因子)抗體 0.1ml
Anti-Caspase-9/FITC 熒光素標(biāo)記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
OFQ/N(Mouse orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit 小鼠孤腓肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CACNA1G/Cav3.1 /FITC 熒光素標(biāo)記電壓依賴(lài)性鈣通道Cav3.1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EGR3 早期生長(zhǎng)反應(yīng)蛋白3抗體 規(guī)格 0.1ml
LH (Rabbit luteotropic hormone) ELISA Kit 兔子促黃體激素 96T
MCL1 英文名稱(chēng): 髓樣細(xì)胞白血病-1抗體 0.1ml
APC 英文名稱(chēng): 腺瘤樣息肉抗體 0.1ml
Anti-CACNA1G/Cav3.1 /FITC 熒光素標(biāo)記電壓依賴(lài)性鈣通道Cav3.1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
AMA ELISA Kit 大鼠抗心肌抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ATRN/FITC 熒光素標(biāo)記吸引素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FABP4 脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白 規(guī)格 0.1ml
小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞;EACLZM(Mouse Lysozyme) ELISA Kit 小鼠 96T
MCK10 英文名稱(chēng): 神經(jīng)上皮酪酸激酶/癌激酶10抗體 0.1ml
phospho-Amyloid Precursor Protein (Tyr757) 英文名稱(chēng): 0酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體 0.1ml
Anti-ATRN/FITC 熒光素標(biāo)記吸引素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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