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人Adenovirus5轉(zhuǎn)化胚腎細(xì)胞;2V6.11

參  考  價:4500
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號

  • 品牌

  • 廠商性質(zhì)

    經(jīng)銷商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

1×106 4500元 12件可售

更新時間:2024-07-10 16:48:55瀏覽次數(shù):225次

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貨號 AXB10252 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣 生長特性 貼壁細(xì)胞
人Adenovirus5轉(zhuǎn)化胚腎細(xì)胞;2V6.11公司正在出售的產(chǎn)品:A-498人腎細(xì)胞癌細(xì)胞 A498:A-498 D341 Med人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞 D341Med:D341 Med NCI-H28細(xì)胞 NCIH28:NCI-H28 JEG-3人絨毛膜癌細(xì)胞 JEG3:JEG-3 HME2(黑色素瘤細(xì)胞) HME2:HME2 NCI-N87+LUC人胃癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記

產(chǎn)品公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

產(chǎn)品名稱

Adenovirus5轉(zhuǎn)化胚腎細(xì)胞;2V6.11

貨號

AXB10252

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

英文名

2V6.112V611

分類

人細(xì)胞系

用途

僅供科研研究實驗

 

商品介紹:

種屬

人類

年齡(性別)

男性,胎兒

組織來源

腎;用腺病毒5(Ad5)DNA轉(zhuǎn)化;用腺病毒前區(qū)4質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染

細(xì)胞形態(tài)

貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

詳情介紹

2V6.11細(xì)胞是2001年從人胚腎細(xì)胞株293 [HEK-293]衍化而來,293 [HEK-293]細(xì)胞用攜帶Zeocin-抗性標(biāo)記的質(zhì)粒pVgRXR轉(zhuǎn)染得到293pVgRXR細(xì)胞。隨后,用包含編碼E4 24KAd5 E4ORF6基因的質(zhì)粒pEKORF6轉(zhuǎn)染。pEKORF6從包含潮霉素抗性基因的質(zhì)粒pIndHydro衍生而來,載體包含SV40病毒序列。2V6.11細(xì)胞株最初從含潮霉素的培養(yǎng)液中用克隆環(huán)分離單克隆得到。2V6.11細(xì)胞誘導(dǎo)表達(dá)的人腺病毒E4 34KDa蛋白可通過免疫印跡法檢測;2V6.??

生長培養(yǎng)基

MEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例

1:2-1:4

推薦換液頻率

2~3/

 

凍存條件


凍存液

55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度

液氮

培養(yǎng)條件


氣相

空氣,95%;CO25%

溫度

37℃

保藏機構(gòu)

ATCC; CRL-2784 ATCC; JHU-67

 

人Adenovirus5轉(zhuǎn)化胚腎細(xì)胞;2V6.11

細(xì)胞凍存注意事項:
(1)  細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候,這時細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2)  保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3)  細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4)  儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。

人Adenovirus5轉(zhuǎn)化胚腎細(xì)胞;2V6.11

 

操作步驟:

(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。

(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)

A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。

B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。

分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。

(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。

(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達(dá)效率。

公司正在出售的產(chǎn)品:

Lptn/LTN/XCL1(Mouse lymphotactin) ELISA Kit 小鼠淋巴細(xì)胞趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-C/EBP Beta/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Goat IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的驢抗羊IgG 規(guī)格 0.1ml

Mouse mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA kit 小鼠粘蛋白/粘液素5B 96T

LEO1 英文名稱: RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體 0.1ml

APOC3 英文名稱: 載脂蛋白C3抗體 0.2ml

Anti-C/EBP Beta/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

16- Alpha OHE-1(Mouse 16- AlphaHydroxyestrogen 1)ELISA Kit Hpt/HP小鼠16α羥基雌酮1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-CLDN4/Claudin 4/FITC 熒光素標(biāo)記緊密連接蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh DLK1 穿膜蛋白DLK1抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-human IgA/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗人IgA 0.1ml

LEO1 英文名稱: RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體 0.1ml

苯唑青檢測試劑盒 96孔/盒 動物組織/水產(chǎn)/蜂蜜/奶

Anti-CLDN4/Claudin 4/FITC 熒光素標(biāo)記緊密連接蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

E2 ELISA KIT 魚雌二醇Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Phospho-DARPP32 (Thr34) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化多巴胺、cAMP調(diào)節(jié)0蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh CYP46 24S-羥化酶 規(guī)格 0.2ml

Goat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記羊IgG(細(xì)胞流式同型對照) 0.1ml

Lens culinaris agglutinin 英文名稱: 扁豆凝集素 0.2ml

Rhesus antibody Rh YES1 原癌基因酪蛋白激酶Yes1抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-Phospho-DARPP32 (Thr34) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化多巴胺、cAMP調(diào)節(jié)0蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

MYO/MB(Mouse Myoglobin) ELISA Kit 小鼠肌紅蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Cullin 4a/FITC 熒光素標(biāo)記Cullin 4a蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Adenovirus5轉(zhuǎn)化胚腎細(xì)胞;2V6.11Rhesus antibody Rh DCUN1D2 DCN1樣蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml

Horse IgM/APC 熒光素APC標(biāo)記馬IgM 0.1ml

L-ENK 英文名稱: 亮酸腦啡肽抗體 0.1ml

類藥單克隆抗體 小鼠單抗 1

Anti-Cullin 4a/FITC 熒光素標(biāo)記Cullin 4a蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml


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