SDH琥珀酸脫氫酶檢測試劑盒可見分光光度法-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號	FS-01S63462

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

規(guī)格：50管/48樣

檢測方法：可見分光光度法

貨號：FS-01S63462
商品介紹：

測定意義

SDH（EC 1.3.5.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。SDH是線粒體的一種標(biāo)志酶，位于線粒體內(nèi)膜上的一種膜結(jié)合酶，是連接呼吸電子傳遞和氧化磷酸化的樞紐之一。此外，為多種原核細(xì)胞產(chǎn)能的呼吸鏈提供電子。

測定原理

SDH催化琥珀酸脫氫生成延胡索酸，脫下的氫通過吩嗪二甲酯硫酸（PMS）傳遞還原2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），并且在600nm處具有特征吸收峰，通過600nm吸光度的變化，測定2．6-DPIP的還原速度，代表SDH酶活性。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白B(NGFIB)檢測試劑盒枯草芽孢桿Sheep L-LDH (L-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit

生長因子受體結(jié)合蛋白2(Grb2)檢測試劑盒矩圓黑盤孢Sheep FBG (Fibrinogen) ELISA Kit

毛狀樣蛋白1(COTL1)檢測試劑盒金灰青霉Sheep C1q (Complement 1q) ELISA Kit

腓骨蛋白7(FBLN7)檢測試劑盒淺青紫鏈霉Sheep IL-1R2 (Interleukin 1 Receptor Type II) ELISA Kit

溶質(zhì)載體家族1成員5(SLC1A5)檢測試劑盒梨形卷枝霉Sheep F-Box Protein 2(FBXO2) ELISA Kit

P物質(zhì)(SP)檢測試劑盒楊樹菇5號Sheep NXF1 (Nuclear RNA Export Factor 1) ELISA Kit

猬因子相互作用蛋白(HHIP)檢測試劑盒釀酒酵母Sheep NNE (Non-Neuronal Enolase) ELISA Kit

微纖絲關(guān)聯(lián)蛋白4(MFAP4)檢測試劑盒白假絲酵母Sheep IgG3 (Immunoglobulin G3) ELISA Kit

左右決定因子1(LEFTY1)檢測試劑盒谷棒桿Sheep NTRK3 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3 ) ELISA Kit

轉(zhuǎn)膠蛋白(TAGLN)檢測試劑盒樹舌靈芝Sheep WARS (Tryptophanyl tRNA Synthetase) ELISA Kit

過氧化氫(CAT)檢測試劑盒簡青霉Sheep AFGF/FGF1 (Acidic Fibroblast Growth Factor 1) ELISA Kit

色P450氧化還原(CPR)檢測試劑盒大腸桿Sheep MUC17 (Mucin 17) ELISA Kit

弗林蛋白(FUR)檢測試劑盒猴頭Sheep ANG2 (Angiopoietin 2) ELISA Kit

微精蛋白β(MSMβ)檢測試劑盒東方伊薩酵母Sheep COL13 (Collagen Type XIII) ELISA Kit

銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(COPT1)檢測試劑盒孟氏假單胞Sheep Cyt-C (Cytochrome C) ELISA Kit
SDH琥珀酸脫氫酶檢測試劑盒可見分光光度法喜樹分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%氯亞鉑 ARAnti-LAIR-1/CD305 白相關(guān)球蛋白樣受體1抗體

喜樹 97%醋鈀 AR，Pd 46.0 - 48.0 %Anti-Layilin 透明質(zhì)受體抗體

二乙酯 98%氧化鈀 Pd ≥85% Anti-LAIR-2/CD306 白相關(guān)球蛋白樣受體2抗體

多烯紫杉 98%無水氧化鉑鉑含量≥85.4% Anti-LC3A/B 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體

7-乙基-10-羥基喜樹 98%硝鉑溶液 Pt, 15%Anti-LCAT 卵磷膽酰基轉(zhuǎn)移抗體

10-羥基喜樹分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%氯化鈀 Pd 59-60%Anti-LATS1 腫瘤抑制基因LATS1抗體

紫杉分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98% 硝鈀(II) 水合物 Pd ≥39.0%Anti-Phospho-LATS1 (Thr1079) 磷化腫瘤抑制基因LATS1抗體

紫杉 98%鈀粉 99.9% metals basis，粒徑0.5μmAnti-Phospho-LATS1 (Ser909) 磷化腫瘤抑制基因LATS1抗體