當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T肝細胞生長因子ELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
肝細胞生長因子ELISA試劑盒 | hepatocyte growth factor | FS-P65243 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體產(chǎn)品別名: 2-庚乳鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)
內(nèi)皮受體蛋白酪氨激酶抗體產(chǎn)品別名: 己二二辛酯乳依沙吖啶(標(biāo)準(zhǔn)品)
酪氨蛋白激酶受體B2抗體產(chǎn)品別名: 萘1,3,6-三磺三鈉鹽水合物乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化雌激素受體ER alpha 抗體產(chǎn)品別名: 2-溴-7-芴瑞格列奈(標(biāo)準(zhǔn)品)
重組增強型綠色熒光蛋白抗體產(chǎn)品別名: 壬乙酯瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)
雌激素受體α抗體(用于western blot)產(chǎn)品別名: 乙氧亞甲二塞克硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
雌激素受體α/β抗體產(chǎn)品別名: 對二乙氧苯塞來昔布,塞內(nèi)昔布(標(biāo)準(zhǔn)品)
自分泌運動因子抗體產(chǎn)品別名: 甲對甲氧芐酯噻奈普汀;噻奈普汀(標(biāo)準(zhǔn)品)
酪氨蛋白激酶A3受體抗體產(chǎn)品別名: 鹽伊托必利三(羥甲)甲甘氨(標(biāo)準(zhǔn)品)
EHM2蛋白抗體產(chǎn)品別名: 磺酰唑草酮三苯雙脒(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化真核翻譯起始因子4E抗體產(chǎn)品別名: 6-溴-4-羥-3-喹啉羧乙酯間酚(1,3,5-氧苯)(標(biāo)準(zhǔn)品)
翻譯延伸因子EF-1a抗體產(chǎn)品別名: -2-苯乙酯三化釓六水合物
磷化雌激素受體α抗體產(chǎn)品別名: 苯甲酯三生(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化表皮生長因子受體抗體產(chǎn)品別名: 2-脫氧-2,2-二氟-D-赤式-五呋喃糖-3,5-二苯甲酯-1-甲磺酯三叔?。?biāo)準(zhǔn)品)
磷化絲裂原活化蛋白激酶1抗體產(chǎn)品別名: 磺間甲氧嘧啶三蔗糖(標(biāo)準(zhǔn)品)
肝細胞生長因子ELISA試劑盒Human Anti-Surv(Anti-Survivin Antibody) ELISA Kit木拉克酵母屬拉丁屬名: Mrakia robertii
Human ANKRD1(Ankyrin Repeat Domain 1) ELISA Kit植物乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
Human AP(Allopregnanolone) ELISA Kit耐熱鹽土生古菌拉丁屬名: Haloterrigena thermotolerans
Human AP17(Apelin 17) ELISA Kit枯草芽孢桿菌枯草亞種拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
Human ATF-1(Activating Transcription Factor 1) ELISA Kit隆紋黑蛋巢拉丁屬名: Cyathus striatus
Human AP13(Apelin 13) ELISA Kit樟疫霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human ALDOA(Aldolase A, Fructose Bisphosphate) ELISA Kit釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Human Anti-AChR(Anti-Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
Human ALP(Alkaline Phosphatase) ELISA Kit灰孔多年臥孔菌拉丁屬名: Perenniporia tephropora
Human AMA IgA(Anti-Myelin antibody IgA) ELISA Kit漏斗狀側(cè)耳注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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