當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白6撫生ELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白6撫生ELISA試劑盒 | Tumor Necrosis Factor Alpha Induced Protein 6 | FS-P66158 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
孤兒核受體TAK1抗體MIP-4 人巨噬炎性蛋白-4鹽妥拉唑林(標(biāo)準(zhǔn)品)
骨巢蛋白抗體MIP-5 人巨噬炎性蛋白-5鹽硫利達(標(biāo)準(zhǔn)品)
軸突生長誘向因子5抗體MCP-1 人巨噬趨化蛋白-1鹽卡替洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化p-IκB-α抗體MSLN human 人間皮素二磺阿米三(標(biāo)準(zhǔn)品)
G21蛋白質(zhì)抗體MDA(Human malondialchehyche) 二(人)蘿巴新(標(biāo)準(zhǔn)品)
醌氧化還原酶抗體RANTES 人趨化因子卡莫氟(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)肽Y1受體抗體mmp-2(Human) 質(zhì)金屬蛋白酶-2(人)奧沙普秦(標(biāo)準(zhǔn)品)
谷氨受體1抗體ILK-1(Human) 人整合素連接激酶1尼可占替諾(煙占替諾)標(biāo)準(zhǔn)品
谷氨受體調(diào)節(jié)蛋白2抗體Human complement factor H,CFH 人自身免疫類ELISA試劑盒表戈米辛O(標(biāo)準(zhǔn)品)
水解酶1抗體G-CSF 人粒-集落激因子卡巴膽堿(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白抗體NO(Nitric Oxide )human 一氧化氮(人)琥珀鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
核孔蛋白50抗體GM-CSF 人粒-巨噬集落激因子回拉西坦;茴拉西坦(標(biāo)準(zhǔn)品)
軸索過度生長抑制因子-A抗體M-CSF 人巨噬-集落激因子卡絡(luò)磺鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
一氧化氮合成酶-1抗體(神經(jīng)型)LIF 人白血病抑制因子卡絡(luò)磺鈉
一氧化氮合成酶-3(內(nèi)皮型)抗體Lysozyme(human) 溶菌酶(人)泛鈣,維生素B5
腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白6撫生ELISA試劑盒Anti-RPGR Antibody阿利坎特港富鹽菌拉丁屬名: Haloferax lucentensis
Anti-RPS27 Antibody(原貨號PB1134)米曲霉拉丁屬名: Aspergillus oryzae
Anti-RPL19 AntibodyThermobifida拉丁屬名: Thermobifida halotolerans
Anti-RPS6 Antibody耐賴氨芽孢桿菌拉丁屬名: Lysinibacillus boronitolerans
Anti-RPS3 Antibody釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Anti-RPS6KA1 Antibody光滑青霉拉丁屬名: Penicillium glabrum
Anti-RPS6KA2 Antibody嗜熱鏈球菌拉丁屬名: Streptococcus thermophilus
Anti-RPS6KA1 AntibodypBV220規(guī)格: 1ml甘油管1支,20ul質(zhì)粒,一般次日下午
Anti-RPSA Antibody黃柄曲霉拉丁屬名: Aspergillus flavipes
Anti-RPS6KA3 Antibody紅細菌拉丁屬名: Rhodobacter sp.
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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