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IL-11elisa試劑盒試驗時須注意以下的一些細(xì)節(jié):
1、實驗板孔加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)孔的孵育時間一致。
2、固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維 素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。
3、包被抗體或抗原的選擇:將抗體或抗原吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一 般要求PH在9.0~9.6之間。
4、酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定。然后再固定其 它條件或采取“方陣法",在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
5、取出板條前恢復(fù)到室溫后再打開外包裝袋,實驗中不用的板條立即放回包裝中,密閉封口,其余不用試劑應(yīng)蓋好。
6、實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
7、洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水。
8、試劑盒內(nèi)試劑請在保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號試劑不要混用。
9、酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而 本身無色。有些供氫體有潛在的致癌作用,ELIAS試劑盒應(yīng)注意防護。
10、1000pg/ml以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。大于1000pg/ml 的樣品應(yīng)以標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液稀釋后重做。在結(jié)果分析時,結(jié)合考慮相應(yīng)的稀釋度。
11、按豬ELISA試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于 洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用 試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存。
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