當(dāng)前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>輔酶Ⅰ系列>> NAD激酶測試盒100管/48樣
貨號 | BJ-01S9512 |
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
NAD激酶測試盒100管/48樣 | 微量法 | 100管/48樣 | BJ-01S9512 |
商品介紹:
NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是目前所發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無機(jī)多聚磷酸[poly(P)]作為磷?;w進(jìn)行磷酸化反應(yīng),生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及調(diào)節(jié)NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。
測定原理:
NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;NADPH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(lán)(MTT),通過在600 nm下測定MTT的還原速度(吸光值的變化)可反映出NADK活性的大小。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
人 IL17Rb 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
人 CD47 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
人 CD44 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
人 NLGN1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
人 GRN 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
人 EpCAM / TROP1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
人 Syk 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
人 GranzymeH 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
人 ICAM-2 / CD102 轉(zhuǎn)錄變體5 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
人 DCN / Decorin 轉(zhuǎn)錄變體A1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
NAD激酶測試盒100管/48樣豬ELISA試劑盒
豬組織因子(TF)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
豬組織型纖溶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
豬組胺(HIS)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
豬轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)免疫試劑盒*直銷
豬轉(zhuǎn)鐵蛋白(TF)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
豬轉(zhuǎn)錄因子AP-1 免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
豬轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ)免疫試劑盒*直銷
豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
豬主要急性期蛋白(MAP)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
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