產(chǎn)品屬性：  

商品介紹：

NADK（EC 2.7.1.23）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，是目前所發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶，可催化NAD(H)以ATP或無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷?；w進行磷酸化反應(yīng)，生成NADP(H)。因此，NAD激酶在合成NADP(H)以及調(diào)節(jié)NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。

測定原理：

NADK催化NAD+磷酸化，生成NADP+；NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH；NADPH通過PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍（MTT），通過在600 nm下測定MTT的還原速度（吸光值的變化）可反映出NADK活性的大小。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

注意事項：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 （果糖含量測試盒說明書過過濾）。

4 ）. 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

人 S100A1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

人 IL18RAP / IL1R7 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

人 CDH6 / KCAD 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

人 CCL2 / MCP-1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

人 CD50 / ICAM3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

人 HB-EGF 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

人 ELMO1 基因全長ORF克隆

人 FZD6 基因全長ORF克隆

人 ENTPD6 基因全長ORF克隆

人 TNNT2 基因全長ORF克隆

NAD激酶測試盒50管/24樣豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

豬中性粒細胞明膠相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)免疫試劑盒*直銷

豬脂聯(lián)素受體2(ADIPOR2)免疫試劑盒進口、組裝

豬脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)免疫試劑盒進口、分裝

豬脂聯(lián)素(ADP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

豬脂肪酸合成(FAS)免疫試劑盒*直銷

豬脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)免疫試劑盒進口、組裝

豬脂蛋白脂(LPL)免疫試劑盒進口、分裝

豬脂蛋白磷脂A2(Lp-PLA2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

豬脂蛋白α(Lp-α)免疫試劑盒*直銷

豬正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)免疫試劑盒進口、組裝

操作流程：

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。