我司供應(yīng)的elisa進(jìn)口試劑盒免費(fèi)代測(cè)，全程ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)，索取產(chǎn)品說(shuō)明書。
規(guī)格：96T/48T
特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

備試劑與收集血樣：
1.  收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)， 2-8 ℃ 保存48 小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。
2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管，管加標(biāo)本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。
3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測(cè)程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
前列腺癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml25-O-去乙酰基利福布汀25-O-Deacetyl Rifabutin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/ Yamaguchi/7/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) HDAC靶點(diǎn)抑制劑CUDC-101質(zhì)量規(guī)格：>98%

615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株;L7912鹽酸洛美利嗪Lomerizine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17 腹水瘤細(xì)胞,SAC-IIC3細(xì)胞 EMT6細(xì)胞，小鼠細(xì)胞酯蟾毒配基；蟾力蘇(標(biāo)準(zhǔn)品)Resibufogenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人上皮細(xì)胞;MCF-10A蒲公英甾醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Taraxasterol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1腺苷 2':3'-環(huán)單1酸鹽鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Adenosine 2':3'-cyclic monophosphate  salt

IL1R1 Others Human 人 IL1R1 / CD121a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) P1,P5-Di（腺苷-5'-)五1酸鹽，三鋰鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口P1,P5-Di(adenosine-5’-)pentaphosphate, Trilithium Salt

主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)腺苷5‘-O-(-2-硫代三1酸）三鋰鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Adenosine 5′-O-(2-Thiodiphosphate), Trilithium Salt

MST1R Others Human 人 MST1R / CD136 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2-甲基硫代二1酸腺苷質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口2-Methylthio-ADP 3 salt

L-O2 人正常胎肝細(xì)胞腺苷 5'-1酰硫酸 鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Adenosine 5'-phosphosulfate  salt
人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]對(duì)磺酸1克RT

PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) -β-環(huán)糊精 2-Hydroxyethyl)-β-Cyclodextrin,≥99.0% 128446-32-2 25G 通用試劑

狗骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cells肌苷;皇嘌呤核苷;9-β-D-核糖基皇嘌呤 Inosinq;Hypoxcnthosinq;9-β-D-Ribofurcnosylhypoxcnthinq;OxicMinq;Ribonosinq;Trophiccrdyl 28-63-9

HME7細(xì)胞，人色素瘤細(xì)胞 短雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;HH-29氧化發(fā)酵試驗(yàn)(OF)培養(yǎng)基25克

UM-UC-3(人膀胱移行細(xì)胞癌) 5×106cells/瓶×2666-52-4氘代-D6eetonE-D6
人泛素激活酶(E1/UBAE)elisa進(jìn)口試劑盒貓腎細(xì)胞;CRFK 人胚腎細(xì)胞,293[HEK-293]細(xì)胞 Fox-NY細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞鹽酸林可霉素shēng huà shì jì容量：100克

人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92]2-嗎啉基乙基異 2-Morpholinoethyl isocyanide,≥98.0% 78375-48-1 10ML 通用試劑

SEMA5A Others Human 人 SEMA5A / SemaF / Semaphorin-5A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-1醋二酯 L(+)-Diqthyl L-tcrtrctq 87-91-

腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)結(jié)晶碳酸鈉shēng huà shì jì容量：25克

FCGRT & B2M Others Cynomolgus 食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 50-32-83,4-本并芘3,4-Benzopyrene
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無(wú)水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說(shuō)明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過(guò)夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復(fù)染：自來(lái)水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。