當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>> 馬皮疽組織胞漿菌PCR熒光定量檢測試劑盒 分子生物學儀器
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 | 貨號 | BJ-P6851 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
馬皮疽組織胞漿菌PCR熒光定量檢測試劑盒 | Histoplasm farcinimosumPCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6851 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。 2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。 3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
80U 8-氧代DNA糖基化 OGG1(8-Oxoguanine DNA Glycosylase) -20℃保存 15.6-1000 pg/mL 傳染性胃腸炎病毒(PTGV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
皰肉牛肉粒 Dried Meat Particle 100g 0.156-10 ng/mL 人鈷胺傳遞蛋白2(TC-2)ELISA試劑盒
2 ug pLKO-puro-TurboGFP pLKO-puro-TurboGFP 低溫運輸,-20℃保存 0.625-40 ng/mL 人Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒
50T 腦膜炎細菌多重PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存真菌瓊脂培養(yǎng)基 進口、國產(chǎn)Fungi Agar Medium用于無菌生長試驗250
500mL Phospho-Protein Extraction Buffer III Phospho-Protein Extraction Buffer III 常溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Phospholipase D1
100mL 二甲基亞砜 Dimethyl Sulfoxide(DMSO) 室溫干燥避光保存羊膽鹽進口、國產(chǎn)Bile salt from sheep25克BR
10mg L- 轉(zhuǎn)鐵蛋白 Transferrin Human(Partially Saturated) 4℃保存 0.156-10 ng/mL 人酪蛋白激2β(CK II beta)ELISA試劑盒
2 ug pGBT9 pGBT9 低溫運輸,-20℃保存
50次 一管式病毒RNAout One-Tube Viral RNAOUT 4℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain
250mL Sodium Hydroxide Solution(氫氧化鈉溶液),1N Sodium Hydroxide Solution,1N 常溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Microtubule-associated protein 2
2 ug pENTR-Gus pENTR-Gus 低溫運輸,-20℃保存乳酸菌檢測計數(shù)顯色培養(yǎng)基進口、國產(chǎn)乳酸菌檢測計數(shù)顯色培養(yǎng)基250克乳酸菌快速顯色分離培養(yǎng)
馬皮疽組織胞漿菌PCR熒光定量檢測試劑盒Hoechst33342 Staining Solution(1mg/ml) Hoechst33342染色液(1mg/ml) 1ml|5×1ml
Hoechst33342 Staining Solution Hoechst33342染色液(含封片劑) 10ml
Hoechst33258/PI細胞凋亡染色試劑盒 100T
Hoechst33342/PI細胞凋亡染色試劑盒 100T
碘化丙啶PI染色液(50μg/ml) 10ml
碘化丙啶PI染色液(50μg/ml,含RNase) 10ml
碘化丙啶PI染色液(1mg/ml) 1ml|10×1ml
細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒 50T
細胞凋亡-Hoechst染色試劑盒 100T
AO染色液(1mg/ml) 10ml
AO熒光染色試劑盒 100T
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