悉尼馬爾太蟲熒光定量PCR試劑盒探針法-上海邦景實業(yè)有限公司

產(chǎn)地	國產(chǎn)	加工定制	否
適用領(lǐng)域	科研	貨號	BJ-P9777

操作流程

1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。

4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。

6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。

7. 儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。

9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱	英文名稱	規(guī)格	貨號
悉尼馬爾太蟲熒光定量PCR試劑盒探針法	Marteilia sydneyi	多種規(guī)格	BJ-P9777

特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

儲存條件：-20℃以下，有效期12個月。

PCR檢測試劑盒 (2).jpg

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer 5μl

dNTP mixl 4μl

引物1（10pM） 2μl

引物2（10PM） 2μl

Taq酶（2U/μl） 1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至 50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

三、注意事項

１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。

２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。

３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。

６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。

HCVRNA復(fù)制抑制劑(Sofosbuvir impurity H)Sofosbuvir impurity H1mL(10mM)|1mg|5mg

人類環(huán)氧化物水解酶抑制劑(Valpromide)Valpromide1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

HCVRNA復(fù)制抑制劑(Sofosbuvir impurity F)Sofosbuvir impurity F1mL(10mM)|1mg|5mg

β-lactamase抑制劑(AAI101)AAI1011mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

PI4KB抑制劑（T-00127_HEV1）T-00127_HEV11mL(10mM)|5mg

腸病毒衣殼抑制劑(Pocapavir)Pocapavir1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

脂質(zhì)過氧化抑制劑(Eugenol)Eugenol1mL(10mM)|100mg|500mg

真菌抑制劑(Ravuconazole)Ravuconazole1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg

單胺氧化酶和前列腺素合成抑制劑(Amitraz)Amitraz1mL(10mM)|100mg

M2離子通道抑制劑(M2 ion channel blocker)M2 ion channel blocker1mL(10mM)|100mg

悉尼馬爾太蟲熒光定量PCR試劑盒探針法大鼠 IL17RA / IL17R 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)AP聯(lián)NBT/BCIP*間接檢測試劑盒 10次

大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)（含一抗和AP二抗）

大鼠 Cripto / TDGF1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)AP聯(lián)NBT/BCIP直接檢測試劑盒 10次

狗 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)（含AP一抗）

狗 IL1R2 / IL1RB 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)石蠟切片免疫組織化學(xué)HRP聯(lián)DAB基礎(chǔ)檢測試劑盒（無一抗和二抗） 50次

狗 NRG1-alpha (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)石蠟切片免疫組織化學(xué)HRP聯(lián)DAB間接檢測試劑盒（含HRP二抗） 20次

狗 NRG1-alpha (EGF Domain) 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)石蠟切片免疫組織化學(xué)HRP聯(lián)DAB*間接檢測試劑盒 10次

狗 IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)（含一抗和HRP二抗）

狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)石蠟切片免疫組織化學(xué)HRP聯(lián)DAB直接檢測試劑盒（含HRP一抗） 10次

狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)石蠟切片免疫組織化學(xué)AP聯(lián)NBT/BCIP基礎(chǔ)檢測試劑盒（無一抗和二抗） 50次

狗 Fractalkine / CX3CL1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)石蠟切片免疫組織化學(xué)AP聯(lián)NBT/BCIP間接檢測試劑盒（含AP二抗） 20次

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