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產(chǎn)地	國(guó)產(chǎn)	加工定制	否
適用領(lǐng)域	科研	貨號(hào)	BJ-P9445

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱	英文名稱	規(guī)格	貨號(hào)
匙形古柏線蟲熒光定量PCR試劑盒探針法	Cooperia punctata	多種規(guī)格	BJ-P9445

特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

儲(chǔ)存條件：-20℃以下，有效期12個(gè)月。

PCR檢測(cè)試劑盒 (2).jpg

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer 5μl

dNTP mixl 4μl

引物1（10pM） 2μl

引物2（10PM） 2μl

Taq酶（2U/μl） 1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至 50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

三、注意事項(xiàng)

１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。

２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。

３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。

６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。

操作流程

1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。

4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。

6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。

7. 儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。

9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

2 ug pBpSTR1 pBpSTR1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

氯化鈉三糖鐵瓊脂 NaCl Triple Sugar Iron Agar 250g

10mg 5′ - 三鳥苷三鈉 Guanosine 5′-Triphosphate (GTP),Trisodium -20℃保存

50T 金黃菌PCR檢測(cè)試劑盒低溫運(yùn)輸，-20℃保存

250mL Karnovsky固定液 Karnovsky Fixative Solution 常溫保存

50mL Beta Glycerophosphate Solution（beta-甘油溶液）,100mM Beta Glycerophosphate Solution,100mM 常溫保存

50mL DN2-Mercaptoethanol(2)

2 ug pG5lac pG5lac 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

0.1%煌綠 1ml*20

1瓶 CCC-HSF-1細(xì)胞株 CCC-HSF-1 低溫運(yùn)輸和保存

細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基（不含瓊脂） 250g

匙形古柏線蟲熒光定量PCR試劑盒探針法大鼠 HSPA8 基因全長(zhǎng)ORF克隆魚(Cortisol)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠 ECM1 基因全長(zhǎng)ORF克隆魚內(nèi)皮素1(ET-1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠 RPAP3 基因全長(zhǎng)ORF克隆魚免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒*直銷

大鼠 TMEM130 基因全長(zhǎng)ORF克隆魚免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

大鼠 CDC6 基因全長(zhǎng)ORF克隆魚卵泡刺激素(FSH)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠 ANKRD46 基因全長(zhǎng)ORF克隆魚卵黃高磷蛋白(PV)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠 HAUS3 基因全長(zhǎng)ORF克隆魚烯醇丙酮酸羧激,線粒體(PCK2)免疫試劑盒*直銷

大鼠 PKM 基因全長(zhǎng)ORF克隆魚烯醇丙酮酸羧激,細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)[GTP](PCK1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

大鼠 BCAP29 基因全長(zhǎng)ORF克隆魚化乙酰輔A羧化(pACCase)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠 CTSQ2 基因全長(zhǎng)ORF克隆魚果糖激(PFK)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠 PRAF2 基因全長(zhǎng)ORF克隆魚類三碘甲狀腺原(T3)免疫試劑盒*直銷

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