頭狀葡萄球菌熒光定量PCR試劑盒探針法-上海邦景實業(yè)有限公司

產(chǎn)地	國產(chǎn)	加工定制	否
適用領域	科研	貨號	BJ-P10067

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱	英文名稱	規(guī)格	貨號
頭狀葡萄球菌熒光定量PCR試劑盒探針法	Staphylococcus capitis	多種規(guī)格	BJ-P10067

特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。

3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

儲存條件：-20℃以下，有效期12個月。

PCR檢測試劑盒 (2).jpg

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer 5μl

dNTP mixl 4μl

引物1（10pM） 2μl

引物2（10PM） 2μl

Taq酶（2U/μl） 1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至 50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

三、注意事項

１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。

２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。

３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。

６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。

７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。

操作流程

1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。

3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。

4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。

6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。

7. 儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。

9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

扁蓄苷 Avicularin 572-30-5

蝙蝠葛堿 Dauricine 524-17-4

扁塑藤素 Pristimerin 1258-84-0

扁蓄苷 Avicularin 572-30-5

表大戟二烯醇 Tirucallol

表告依春 epigoitrin 1072-93-1

表兒茶素 Epicatechin 490-46-0

表兒茶素沒食子酸酯 ECG 1257-08-5

表沒食子兒茶素沒食子酸酯 EGCG 989-51-5

表沒食子兒茶素 EGC 970-74-1

頭狀葡萄球菌熒光定量PCR試劑盒探針法重組大鼠 IL3 / interleukin 3 蛋白 (His 標簽)藍藻B-HEPES培養(yǎng)液 500毫升

重組狗 IL5 蛋白 (His 標簽)小量藍藻基因組DNA氯化銫萃取試劑盒 20次

重組狗 Interleukin-2 / IL-2 蛋白 (147 Cys/Ser)大量藍藻基因組DNA氯化銫萃取試劑盒 5次

重組小鼠 IL5 蛋白 (His 標簽)藍藻甲磺酸乙脂突變誘導試劑盒 10次

重組大鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白小量微藻基因組DNA萃取試劑盒（高多糖/） 20次

重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 (His 標簽)大量微藻基因組DNA萃取試劑盒（高多糖/） 5次

重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白 (His 標簽)小量微藻基因組DNA氯化銫萃取試劑盒（高多糖/） 20次

重組人 IL13 / ALRH 蛋白簡單細甲基藍染色試劑盒 50次

重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白簡單細結(jié)晶紫染色試劑盒 50次

重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白簡單細品紅染色試劑盒 50次

重組人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白 (His 標簽)細苯胺黑負性染色試劑盒 50次

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