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上海邦景實業(yè)有限公司
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溶血性曼氏桿菌熒光定量PCR試劑盒探針法

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-07-18 10:25:05瀏覽次數(shù):119次

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產(chǎn)地 國產(chǎn) 加工定制
適用領(lǐng)域 科研 貨號 BJ-P9767
溶血性曼氏桿菌熒光定量PCR試劑盒探針法公司正在出售的產(chǎn)品:1瓶 MDCK(NBL-2)細(xì)胞株 MDCK(NBL-2) 低溫運輸和保存腸道菌增菌肉湯(EE) Enterobacteria Enrichment Broth 250g5g 芐瞇鹽酸鹽 Benzamidine Hydrochloride 4℃保存100mL TE Buffer,50X,pH8.0 TE Buffer,50X,pH8.0

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

貨號

溶血性曼氏桿菌熒光定量PCR試劑盒探針法

Mannheimia haemolytica

多種規(guī)格

BJ-P9767

2.jpg

特點:

1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。

PCR檢測試劑盒 (2).jpg



實驗過程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

 

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物110pM              2μl

引物210PM             2μl

Taq酶(2U/μl           1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

ddH2O              50 μl

PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

三、注意事項

1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。

2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。

3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。

6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。

 

 

操作流程

1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。

4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。

6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。

7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。

9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

PDI抑制劑(Ribostamycin sulfate)Ribostamycin sulfate1mL(10mM)|50mg

helicase-primase抑制劑(AmenamevirAmenamevir1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

HCV NS5A抑制劑(PibrentasvirPibrentasvir1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

錘頭核酶抑制劑(Framycetin)Framycetin1mL(10mM)|5mg|10mg

堿性磷酸酶抑制劑(Tetramisole hydrochloride)Tetramisole hydrochloride1mL(10mM)|2g

HIV-1核苷酸逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑GS-7340 hemifumarate1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

HIV抑制劑(Pentosan PolysulfatePentosan Polysulfate100mg

DHFR抑制劑(Proguanil)Proguanil1mL(10mM)|10mg|25mg|50mg

NF-κB抑制劑(Lipoic acid)Lipoic acid1mL(10mM)|500mg

S1P抑制劑(PF429242 dihydrochloridePF429242 dihydrochloride1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

溶血性曼氏桿菌熒光定量PCR試劑盒探針法 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)Insulin(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

食蟹猴 BTLA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)Insulin R-alpha(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)FSH-beta(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)TSHbeta(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

大鼠 Layilin / LAYN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)IL-1 alpha(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)IL-1 beta(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

大鼠 CLEC2D / OCIL 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)IL-2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)IL-3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

大鼠 IL22BP / L22RA2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)IL-4(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

大鼠 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)IL-5(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

IL2RB / IL2 Receptor beta 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)IL-6(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克


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