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產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 | 貨號 | BJ-P7189 |
操作流程
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
卟啉單胞菌通用PCR熒光定量檢測試劑盒 | Porphyromonas spp.PCR | 多種規(guī)格 | BJ-P7189 |
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。 2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。 3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。 4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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100次 一管式DNA膠回收試劑盒 Magic Gel DNABACK 4℃保存 0.78-50 ng/mL 人3-羥基3-甲基戊二酰還原(HMGCR)ELISA試劑盒
250mL PIPES Buffer,1.0M, pH8.0 PIPES Buffer,1.0M, pH8.0 常溫保存
25mL Agarose Gel Loading Buffer-Sucrose (蔗糖型上樣液),6X Agarose Gel Loading Buffer-Sucrose ,6X 常溫保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Peroxidasin homolog
致瀉大腸埃希氏菌生化套裝 8種*2套/盒
3%NaCl乳糖 20支
1 管 M15大腸桿菌 M15 E.coli Strain -80℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Glutaminyl-peptide cyclotransferase-like protein
含TSA培養(yǎng)基平板 7cm/個*10 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Arylsulfatase D
2 ug pCAMBIA1301 pCAMBIA1301 低溫運輸,-20℃保存
25mL E.coli Sample Buffer E.coli Sample Buffer 常溫保存 0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human 85 kDa calcium-independent phospholipase A2
厭氧肉肝湯培養(yǎng)基 Anaerobic Beef Liver Broth 250gD-E中和肉湯進口、國產(chǎn)E Neutralizing Broth250克經(jīng)防腐劑或消毒劑處理的樣品
1g n- 十二烷基-β-D- 麥芽糖苷 n-Dodecyl-β-D-Maltoside 常溫保存 0.156-10 ng/mL 人?;D(zhuǎn)移(LCAT)Elisa試劑盒
卟啉單胞菌通用PCR熒光定量檢測試劑盒Immunol Fluorence Staining Kit with Alexa Fluor 488-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG Alexa Fluor 488抗兔免疫熒光染色試劑盒 >300次
Immunol Fluorence Staining Kit with AMCA-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG AMCA抗兔免疫熒光染色試劑盒 >300次
Immunol Fluorence Staining Kit with Alexa Fluor 350-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG Alexa Fluor 350抗兔免疫熒光染色試劑盒 >300次
Immunol Fluorence Staining Kit with Cy3-Labeled Donkey Anti-Goat IgG Cy3抗山羊免疫熒光染色試劑盒 >300次
Immunol Fluorence Staining Kit with FITC-Labeled Goat Anti-Human IgG FITC抗人免疫熒光染色試劑盒 >300次
Immunol Fluorence Staining Kit with Cy3-Labeled Goat Anti-Rat IgG Cy3抗大鼠免疫熒光染色試劑盒 >300次
Antifade Mounting Medium 抗熒光淬滅封片液(強) 5ml
Antifade Mounting Medium 抗熒光淬滅封片液 5ml
Antifade Polyvinylpyrrolidone Mounting Medium 抗熒光淬滅PVP封片液 5ml
Glycerol Jelly Mounting Medium 甘油明膠封片液(Kaiser封片液) 10ml
Polyvinylpyrrolidone Mounting Medium PVP封片液 10ml
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