一、樣品 DNA 的制備

用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。

二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。

3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。

4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。

5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。

6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。

7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。

8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

服務(wù)流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱：莫氏立克次氏體PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒

英文名稱：Rickettsia mooseriPCR

貨號(hào):BJ-P7242

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

運(yùn)輸：低溫

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

實(shí)驗(yàn)外包:

基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、使用方法:

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測(cè)：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：

1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。

5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

Herpesvirus Saimiri(HVS)松鼠猴皰疹病毒LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周GDF10  生分化因子10抗體（TGF-β超家族10） 規(guī)格: 0.1ml

Loboa lobai羅布羅布芽生探針法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Cy7  Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

Elm phloem necrosis phytoplasma榆韌皮部壞死植原體PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周CCL4/MIP-1 Beta  巨噬細(xì)胞性蛋白1β抗體 規(guī)格: 0.1ml

Radix cynanchi atrati白薇PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周C20orf103  20號(hào)染色體開放閱讀框103抗體 規(guī)格: 0.2ml

Fowl Pox Virus(FPV)禽痘病毒LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Phospho-Bad(Ser112)  磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

Edwardsiella tarda遲鈍愛德華探針法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周UNC93B  內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白UNC93B抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rhizoma coptidis黃連染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周MFAP3L  微絲相關(guān)蛋白3樣抗體 規(guī)格: 0.1ml

Human Papillomavirus 12(HPV-12)人瘤病毒12 LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周TASK 3/KCNK9  酸敏性鉀離子通道蛋白抗體 0.2ml

Poliovirus 3 (PV-3)脊髓灰質(zhì)炎病毒3型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周phospho-Crkl(Tyr244)  磷酸化接蛋白CrkL抗體 規(guī)格: 0.1ml

Fructus bruceae鴉膽子PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周VGLUT1/BNP1  腦特異性鈉依賴無機(jī)磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

莫氏立克次氏體PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒細(xì)胞自噬檢測(cè)試劑盒(IF/ICC法)，雙色可選  100-200T

Antifade Mounting Medium  防淬滅封片膠  1ml

Ribonuclease A  Rnase A(10mg/ml)  1ml

Rnase A；Ribonuclease A  核糖核酸酶A(100mg/ml)  2ml|0.5ml

Rhodamine (TRITC)-conjugated Streptavidin  TRITC標(biāo)記親和素  10μl

Fluorescein (DTAF)-conjugated Streptavidin  熒光素標(biāo)記親和素  10μl

建議工作濃度：2～5μg/ml  濃度：1.8mg/ml  熒光劑：5-(4，6-dichlorotriazinyl) Aminofluorescein (5-DTAF)；Amax = 492 nm: Emax = 520 nm

Peroxidase-conjugated Streptavidin  HRP標(biāo)記親和素  10μl

建議工作濃度：0.01-0.1μg/ml(WB with ECL),1-2μg/ml(elisa,IHC,WB)  濃度：1.0mg/ml  Buffer：0.01M 磷酸鈉，0.25M NaCl，pH 7.6

10×Proteinase K  100×蛋白酶K  0.2ml|1ml

5×Proteinase K  50×蛋白酶K  40μl