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人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)elisa進口試劑盒
我司供應的elisa進口試劑盒免費代測,全程ELISA試劑盒實驗技術指導,免費代做實驗,索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
產(chǎn)品名稱 | 人抗細胞膜DNA抗體(cmDNA)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Human anti cell membrane DNA antibody (cmDNA) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10541 |
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L]小鼠成纖維細胞 NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L] mouse fibroblast cells MEM(NaHCO3 1.5g/L, Pyruvate 0.11g/L)+10%FBSDL-鳥氨酸鹽酸鹽(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCDL-Ornithine, mono
IL1B Protein Human 重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白DL-1酸(>99%,BP)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BPDL-Tartaric acid hydrate
PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 RSC96(大鼠雪旺細胞)D-蘋果酸(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRD-Malic acid
CL-0261BC-022(人癌細胞)5×106cells/瓶×2dGTP;三1酸脫氧鳥苷鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR2'-Deoxyguanosine 5'-triphosphate tri salt
IFNB1 Others Mouse 小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 人細胞裂解液 (陽性對照) dCTP;三1酸脫氧胞苷鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR2'-Deoxycytidine 5'-triphosphate di salt
MLF, 小鼠成纖維細胞外消旋N-去甲基異丙嗪質(zhì)量規(guī)格:美國進口rac N-Demethyl Promethazine
人類成纖維細胞系;CNLMG-B5538SKIN 人肝星形細胞*培養(yǎng)基 100mL異丙嗪亞砜質(zhì)量規(guī)格:美國進口Promethazine Sulfoxide
人視網(wǎng)膜色素上皮細胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg4-羥基雷美替胺質(zhì)量規(guī)格:美國進口4-Hydroxy Ramelteon
IL2RG Others Human 人 IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 雷美替胺代謝產(chǎn)物M-II (羥基位點R型和S型混合物)質(zhì)量規(guī)格:美國進口Ramelteon Metabolite M-II (mixture of R and S at the hydroxy position)
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-5(S)-?;疗丈?/span>-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進口(S)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide
HGC-27(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(EGFP標記) 人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC-C假茴香油素,英文名或英文縮寫:Pseudocumol,級別:AR,99%,規(guī)格:1克
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY10023-異酸酯基基三... 3-Isocyanatopropyltrimethoxysilane 15396-00-6 25G 通用試劑
FST Others Human 人 FST / Follistatin ( FS288 ) 人細胞裂解液 (陽性對照) 硼輕化;四輕硼;輕硼化 litxium borohydridq; 16949-12-8
MuM-2B 人眼脈絡色素瘤細胞十四烷shēng huà shì jì容量:1克
RD人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞 RD human maligna embryonal rhabdomyoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS97-30-3α-甲基D-葡萄糖苷alpha-D-metxylglucoside
人抗細胞膜DNA抗體(cmDNA)elisa進口試劑盒人肺癌細胞;A549 [A-549]瓊脂糖(Biowest,電泳級);西班牙瓊脂糖Agarose質(zhì)量規(guī)格:進口原裝Biowest 111860;電泳級
家貓腎細胞;CATK1 肝細胞,HL-7702細胞 MMQ細胞,大鼠垂體瘤細胞聚乙二醇400PEG 400質(zhì)量規(guī)格:BR
人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC-C消膽胺樹脂;考來1胺Cholestyramine resin質(zhì)量規(guī)格:Each g exchanges 1.8 g- 2.2 g of glycocholate
RBP4 Others Mouse 小鼠 RBP4 人細胞裂解液 (陽性對照) 蔗糖Sucrose質(zhì)量規(guī)格:分子生物學級
神經(jīng)前體細胞分化培養(yǎng)基NPCMD-海藻糖二水D-(+)-Trehalose, dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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