使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）     轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

公司產(chǎn)品具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產(chǎn)品名稱：精子冷凍保護劑價格

貨號：BJ-01R3506

規(guī)格：100ml

分類：細胞其他

儲存條件： -20℃,3個月

用途：又名甘油-卵黃-檸檬酸鹽冷凍保護劑，用于精子的冷凍保護,減少因冷凍造成精子的死亡。的精子冷凍保護劑，含卵黃。

注意事項：無菌溶液。含有葡萄糖、檸檬酸鈉、甘油、、卵黃等。

注意事項：

1、盡注意無菌操作，避免污染。

2、避免反復凍融。

3、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

標準溶液的配制：

1.直接配制法    對于純凈的物質(zhì)(稱做基準物質(zhì))可準確進行稱量，用蒸餾水溶解后，轉(zhuǎn)移到一定容積的容量瓶中稀釋至標線，溶液的準確濃度可以直接計算出來。溶質(zhì)的純度、性質(zhì)等對濃度有較大影響，為此，對用來直接配制標準溶液用的基準物質(zhì)必須具備以下條件：

(1)物質(zhì)的純度要高，含量不得低于99.9％，雜質(zhì)的含量應當少到可以忽略的程度。

(2)物質(zhì)的分子組成應與其化學式*符合，包括結(jié)水合物中的結(jié)品水含量也必須與其化學式相符合。如硼砂Na2B4O7·10H2O等。

(3)性質(zhì)穩(wěn)定，貯蔵時應不發(fā)生變化，不易吸收空氣中的水分、二氧化碳等氣體而改變其成分，不易風化潮解和被空氣氧化，烘干時不易分解等。此外最好使用分子量較大的基準物質(zhì)以減小稱量誤差。

2.間接配制法    凡不符合基準物質(zhì)條件的物質(zhì)，可先配制成近似所需濃度的溶液，再用基準物質(zhì)溶液或能與其發(fā)生定量反應的標準溶液進行滴定，求其準確濃度，這種通過滴定來確定準確濃度的操作叫做“標定"。間接法配制近似濃度溶液時不需用分析天平稱量和容量瓶配制，可用臺秤、量筒等器皿。將稱好的物質(zhì)轉(zhuǎn)移到干凈的試劑瓶中，先加少量蒸餾水將其溶解，繼續(xù)用量筒加蒸餾水至需要量即可。由于大多數(shù)試劑不符合基準物的條件，故間接法配制標準溶液是經(jīng)常的。如固體NaOH因易吸收空氣中的水分而潮解和吸收CO2使表面變質(zhì)；濃鹽酸因易揮發(fā)而無法準確稱量；不易得到分析純級的試劑等，這些物質(zhì)的標準溶液須用間接法來配制，經(jīng)標定后再做標準溶液使用。

標準溶液的標定：

1.用基準物質(zhì)標定法

(1)多次稱量法    用減重法精密稱取幾份(如2～3份)基準物質(zhì)，分別倒入編號的干凈錐形瓶(或燒杯)內(nèi)，各加少量蒸餾水溶解，再加指示劑后分別用待標定溶液滴定至等當點，各自記錄所消耗待標定溶液的體積，結(jié)合基準物質(zhì)的重量分別算出溶液的準確濃度，最后取平均值做為標準溶液的濃度。

(2)移液管法    精密稱取一份基準物質(zhì)，在干凈的小燒杯內(nèi)加少量蒸餾水溶解，順玻棒全部轉(zhuǎn)移到已校正好的容量瓶中，多次沖洗燒杯洗液并入容量瓶中，最后配成一定體積的溶液，混勻。每次滴定用配套的移液管吸取并轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，加指示劑后用待標定溶液滴定至等當點，每次做好記錄，根據(jù)所消耗待標定溶液的體積，結(jié)合基準物質(zhì)的重量，分別算出溶液的準確濃度取平均值做為標準溶液的濃度。

2.比較法標定    如果待標定溶液能與某標準溶液進行反應，可吸量一定體積的某標準溶液，用待標定溶液滴定，或吸量一定體積的待標定溶液，用某標準溶液滴定。根據(jù)兩溶液所消耗的毫升數(shù)及某標準溶液的濃度，按N1V1＝N2V2式可以計算出待標定溶液的準確濃度。這種用標準落液來測定待標定溶液準確濃度的過程稱為“比較法"標定。如果某標準溶液的濃度由于某些原因不夠準確時，就會直接影響待標定溶液濃度的準確性，顯然比較法不如用基準物質(zhì)直接標定的方法精確，但比較法簡便易行。

標定完畢，蓋緊標準溶液試劑瓶塞，瓶簽上注明標準溶液名稱、準確濃度和日期等。

Rabbit Myxomatosis Virus(RMV)兔粘液瘤病毒LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Goat Anti-rat IgG/PE  PE標記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

Human Rhinovirus 人鼻病毒通用探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周HLC8/Lung cancer related protein 8  肺相關蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml

Fructus perillae紫蘇子染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周phospho-Akt(Thr450)  磷酸化蛋白激B抗體 規(guī)格: 0.1ml

Red Sea Bream Iridovirus(RSIV)真鯛虹彩病毒LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CDK5RAP1  CDK5激活結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Equine Herpesvirus(EHV)馬皰疹病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ASB3  錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體 規(guī)格: 0.2ml

Diffusely Adherent E.coli(DAEC)彌散黏附性大腸桿（大腸埃希）LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用） 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr1571)  磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 規(guī)格: 0.1ml

Porcine Reovirus豬呼腸孤病毒RT-PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ID3  DNA結(jié)合抑制因子3抗體 規(guī)格: 0.2ml

Tick-borne Encephalitis Virus(TBEV)蜱傳腦炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周SSX5  滑膜肉瘤X斷點蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml

Pseudomonas syringae pv. glycinea丁香假單胞桿大豆致病變種PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周FAM50A  FAM50A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Semen litchi荔枝核PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周MG  雞毒支原體抗體 規(guī)格: 0.2ml

精子冷凍保護劑價格體液誘導型巨噬細胞一氧化氮合成酶（（iNOS /NOS2/mNOS））活性比色法定量檢測試劑盒  20次

細胞結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

組織結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

血液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

體液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

細胞結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成酶（cNOS/NOS1/nNOS）活性熒光定量檢測試劑盒  20次

組織結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成酶（cNOS/NOS1/nNOS）活性熒光定量檢測試劑盒  20次

血液結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成酶（cNOS/NOS1/nNOS）活性熒光定量檢測試劑盒  20次

體液結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成酶（cNOS/NOS1/nNOS）活性熒光定量檢測試劑盒  20次