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人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)elisa進口試劑盒
我司供應的elisa進口試劑盒免費代測,全程ELISA試劑盒實驗技術(shù)指導,免費代做實驗,索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領(lǐng)域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
產(chǎn)品名稱 | 人高速泳動蛋白17(HMG-17)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Human high mobility group protein 17 (HMG-17) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10372 |
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
HFTF細胞,人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞 遲緩真桿菌/遲緩埃格特菌 小耳豬肺細胞;SEP-L2灰氈毛忍冬皂苷乙(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Macranthoidin B
CCL21 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白茴芹內(nèi)酯質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Pimpinellin
P19(小鼠畸胎瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細胞裂解液 (陽性對照) 積雪草苷(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Asiaticoside
小鼠胚胎成纖維細胞;MEF吉馬酮(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品Germacrone
KDM1A Others Human 人 KDM1 / LSD1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 黃體生成激素釋放激素(4-10)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRLHRH (4-10)
Raji(人Butt's瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細胞裂解液 (陽性對照) Benzenesulfonicacid本磺酸500毫克BR,97%
人非小細胞肺癌細胞;NCI-H23甘安醋芐酯隊本磺醋鹽 Bqnzyl glycinctq p-toluqnqsulfonctq 1738-76-7
CD22 Others Mouse 小鼠 Siglec-2 / CD22 人細胞裂解液 (陽性對照) DEAE-葡聚糖凝膠 A-50 DEAE Sephadex A-50 39455-31-7 100G 分離試劑
HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞吡哆醛鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:Pyridoxal xy7nochloride,級別:AR,規(guī)格:25克
M17細胞,神經(jīng)母細胞瘤細胞 非雄激素依賴型前列腺癌細胞,Tsu-Prl細胞 人神經(jīng)束膜細胞RNAHPC miRNA5 μg(錄化)
小型豬腎細胞;MPK派洛寧G,英文名或英文縮寫:Pyronin Y,級別:高,98%,規(guī)格:1克
PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 人細胞裂解液 (陽性對照) 雷公藤紅速 Cqlcstrol 34127-83-0
CM-M031小鼠腸動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mLMES,FREEACIDMES緩沖液,一水超級白色結(jié)晶粉末RTsigma
CST6 Others Mouse 小鼠 Cystatin E / CST6 人細胞裂解液 (陽性對照) 天青石蘭,英文名或英文縮寫:Celestine blue B,級別:高,70%,規(guī)格:100克
小鼠前列腺上皮細胞*培養(yǎng)基 100mLAcryl/Bis37.5:1,30%Solution 250ml 進口原料自產(chǎn)
人高速泳動蛋白17(HMG-17)elisa進口試劑盒LMAN2L Others Human 人 LMAN2L 人細胞裂解液 (陽性對照) 蘆丁/蕓香葉苷Rutin質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
人大隱靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL蘆丁/蕓香葉苷(標準品)Rutin質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標準品
Mo-MuLV/3T3細胞,小鼠Mo-MuLv感染的3T3細胞 T/G HA-VSMC(人主動脈血管平滑肌細胞) 人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H2087新橙皮苷二氫查爾酮Neosperidin dihydrochalcone質(zhì)量規(guī)格:≥95%,BR
CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標簽)新橙皮苷二氫查爾酮(標準品)Neosperidin dihydrochalcone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
T84(人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠瘤細胞(NK靶細胞);YAC-1氧化苦參堿Oxymatrine質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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