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產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 | 貨號 | BJ-P6787 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
馬虻PCR熒光定量檢測試劑盒 | Gasterophilus spp.PCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6787 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。 2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。 3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。 4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
1瓶 Jurkat D株 Jurkat D 低溫運輸和保存
BDS培養(yǎng)基 BDS Medium 250g 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Nodal homolog
1000mL TAE,50X TAE,50X 常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Forkhead box protein C2
脆弱擬桿菌活化培養(yǎng)基肉湯 Bacteroides Phage Recovery Medium Broth 250g 15.6-1000 pg/mL 細小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒
100mL 曲拉通 X-114 Triton X-114 室溫保存
100µL 小鼠抗MBP標簽單抗 Anti MBP-Tag Mouse MAb -20℃保存 0.625-40 ng/mL 口蹄疫病毒O亞型(FMDV-O)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
100mL 超級培養(yǎng)基 Super LB Medium 4℃保存,其中成分二-20℃保存,有效期一年。
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Glypican-4
MFB培養(yǎng)基 MFB Medium 250g 3.12-200 U/mL 人內(nèi)皮素3(ET-3/END3)ELISA試劑盒
Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)顆粒 Baird-Parker Agar Base 300ml/袋*10 0.156-10 U/L 人透明質(zhì)酸-1(Hyal-1/HAase)ELISA試劑盒
5次 TdT加尾法DNA標記試劑盒 TdT-Tailing DNA Labeling Kit Series -20℃保存七葉苷培養(yǎng)基進口、國產(chǎn)Esculin Medium250克生化實驗培養(yǎng)基,用于細菌七葉苷水解試驗
1瓶 SP2/0株 SP2/0 低溫運輸和保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Kynureninase
馬虻PCR熒光定量檢測試劑盒去甲斑蝥酸標準品登錄號: 新品待定分子量: 186.16 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色粉末 規(guī)格: 20 mg/支 純度: ≥ 98%
苔黑酚葡萄糖苷標準品英文別名: 1-O-α-D-glucopyranosyl-3-hydroxy-5-methylbenzene 英文名: Orcinol glucoside 登錄號: 21082-33-7 分子式: C13H18O7 分子量: 286.28 分子結(jié)構(gòu):
氧代川南亭堿標準品登錄號: 新品待定分子量: 323 分子結(jié)構(gòu): 規(guī)格: 20 mg/支 純度: ≥ 98% 用途: 用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
升麻酮醇-3-O-α-L-拉伯糖苷標準品分子式: C35H52O9 登錄號: 256925-92-5 分子量: 616.78 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色晶體 規(guī)格: 20 mg/支
黃獨素B標準品登錄號: 20086-06-0 英文名: Diosbulbin B 分子式: C19H20O6 分子量: 344.36 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色針晶粉
桑辛素標準品英文別名: 4H,8H-Benzo(1,2-B:3,4-B’)dipyran-4-one, 2-(2,4-dihydroxyphenyl)-5-hydroxy-8,8-dimethyl-3-(3-methyl-2-butenyl) 英文名: Morusin 登錄號: 62596-29-6 分子式: C25H24O6 分子量: 420.47 分子結(jié)構(gòu):
白綿馬素AA標準品登錄號: 3570-40-9 英文別名: ,5-Cyclohexadien-1-one,2,2'-methylenebis[6-acetyl-3,5-dihydroxy-4,4-dimethyl- 分子式: C21H24O8 分子量: 404.15 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 無色針狀結(jié)晶
穗花杉雙黃酮標準品英文別名: Didemethyl-ginkgetin Amentoflavone; 8-(5-(5,7-dihydroxy-4-oxo-4H-chromen-2-yl)-2-hydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-chromen-4-one 英文名: Amentoflavone 登錄號: 1617-53-4 分子式: C30H18O10 分子量: 538.46 分子結(jié)構(gòu):
黃杞苷標準品登錄號: 572-31-6 英文別名: 3-((6-Deoxy-alpha-L-mannopyranosyl)oxy)-2,3-dihydro-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one (2R-trans) 分子式: C21H22O10 分子量: 434.39 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色結(jié)晶
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