Klenow Fragment(exo-)

商品屬性：

商品介紹：

Klenow 片段（3′→5′ exo-）是 DNA 聚合酶 I 的 N末端截短物，它保留了 DNA 聚合酶活性，但失去了 5′→3′核酸外切酶活性。該酶進一步經(jīng)突變（D355A，E357A）去除了其 3′→5′的核酸外切酶活性。因此該 DNA 聚合酶無任何外切酶活性，僅包含了 DNA 聚合酶活性，廣泛用于標記探針制備、cDNA 第二條鏈的合成等建庫試驗。

單位定義
一個活力單位即在 37°C 條件下，30 分鐘內(nèi)催化 10 nmoldNTP 的摻入反應成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。該酶保存液中含有 50%甘油。
10×Klenow Buffer: 500 mM Tris-HCl (pH 8.0 at 25 °C), 50mM MgCl2, 10 mM DTT. 該酶兼容 PCR Buffer 和內(nèi)切酶Buffer。
應用：
（1）用隨機引物制備探針
（2）隨機引物法標記
（3）cDNA 第二條鏈的合成
（4）該酶不能用于產(chǎn)物平端不齊
失活：
75°C，20min 失活。
儲存：-20℃可保存 3 年。

95°C 5min 冰上放置 5min。
2. 聚合反應
加入 0.5 μl ，混合均勻。37°C 反應 15min，75°C 20min 失活。

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