當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>> 杰米斯頓病毒PCR熒光定量檢測試劑盒
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
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適用領域 | 科研 | 貨號 | BJ-P6789 |
操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
杰米斯頓病毒PCR熒光定量檢測試劑盒 | Germiston VirusRTPCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6789 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。 2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。 3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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2 ug pPinPoint-Xa1 pPinPoint-Xa1 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pED-GST-pp-air pED-GST-pp-air 低溫運輸,-20℃保存
BLB瓊脂 BLB agar 250g 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human C-reactive protein
125mL RIPA Buffer without SDS,2X RIPA Buffer without SDS,2X 常溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Brain-specific serine protease 4
2 ug pEGFP- C1 pEGFP- C1 低溫運輸,-20℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein A-V
250mL TE Buffer,pH8.0 TE Buffer,pH8.0 常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-defensin 1
STAA培養(yǎng)基 STAA Medium 250g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Pulmonary surfactant-associated protein D
CIN培養(yǎng)基 Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 250g 31.2-2000 pg/mL 人G蛋白信號3調(diào)節(jié)物(RGS-3)ELISA試劑盒
250mL Phosphate Buffer,0.5M, pH7.6 Phosphate Buffer,0.5M, pH7.6 常溫保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Sphingomyelin phosphodiesterase
2 ug psiSTRIKE psiSTRIKE 低溫運輸,-20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人肥胖抑制素(OB)ELISA試劑盒
2 ug pFastBac HT A pFastBac HT A 低溫運輸,-20℃保存O157顯色培養(yǎng)基進口、國產(chǎn)O157 Chromogenic Medium用于O157菌的顯色培養(yǎng)1000ml
杰米斯頓病毒PCR熒光定量檢測試劑盒麥角甾醇標準品英文別名: ergosta-5,7,22-trien-3β-ol 英文名: Ergosterol 登錄號: 57-87-4 分子式: C28H44O 分子量: 396.66 分子結構:
氧化槐果堿標準品登錄號: 26904-64-3 英文別名: Sophocarpidine; Sophocarpine N-oxide; (+)-Oxysophocarpine; (+)-Sophocarpine N-oxide; Oxysophocarpine; Sophocarpidin 分子式: C15H24N2O2 分子量: 364.36 分子結構: 外觀: 白色結晶
豆甾醇標準品英文別名: Stigmasta-5,22-dien-3beta-ol; 94%; stigmasta-5,22-dien-3-beta-ol; 24-Ethylcholesta-5,22-dien-3beta-ol 英文名: Stigmasterol 登錄號: 83-48-7 分子式: C29H48O 分子量: 412.69 分子結構:
漢黃芩素標準品英文別名: 5,7-Dihydroxy-8-methoxy-2-phenyl-4H-1-benzopyran-4-one 英文名: Wogonin 登錄號: 632-85-9 分子式: C16H12O5 分子量: 284.26 分子結構:
胡麻屬苷標準品分子式: Cl7H24O12 登錄號: 117479-87-5 分子量: 420.3 分子結構: 外觀: 白色粉末 規(guī)格: 20 mg/支
白蠟樹素標準品英文別名: O,O-dimethylfraxetin;6,7,8-trimethoxycoumarin; 2H-1-Benzopyran-2-one, 6,7,8-trimethoxy 英文名: Dimethylfraxetin 登錄號: 6035-49-0 分子式: C12H12O5 分子量: 236.22 分子結構:
芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷標準品英文別名: Apigenin-7-glucoside; 4H-1-Benzopyran-4-one, 7-(β-D-glucopyranosyloxy)-5-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl) 英文名: Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside 登錄號: 578-74-5 分子式: C21H20O10 分子量: 432.38 分子結構:
異甘草素標準品英文別名: 2',4,4'-Trihydroxychalcone 英文名: Isoliquiritigenin 登錄號: 961-29-5 分子式: C15H12O4 分子量: 256.25 分子結構:
文多靈標準品英文別名: Vindoline free base;Bufexamacum; aspidospermidine-3-carboxylicacid,4-(acetyloxy)-6,7-didehydro-3-hydroxy-16-me;thoxy-1-methyl-,methylester,(2-beta,3-beta,4-beta,5-alpha,12-beta,19-alpha) 英文名: Vindoline 登錄號: 2182-14-1 分子式: C25H32N2O6 分子量: 456.53 分子結構:
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