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產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 | 貨號 | BJ-P6775 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
雪腐鐮刀菌PCR熒光定量檢測試劑盒 | Fusarium nivalePCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6775 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。 2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。 3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
50T 沙門氏菌屬PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人NADPH氧化4(NOX4) ELISA試劑盒
Cary-Blair氏管 Cary-Blair Transport Medium 20支/包 0.312-20 nmol/mL ELISA Kit for Human Cyclin-dependent kinase inhibitor 2A, isoforms 1/2/3
改良馬丁液體培養(yǎng)基 250ml*20瓶 1.56-100 ng/mL 人結(jié)合蛋白4(RBP4)ELISA試劑盒
1mL 單裂解液(RNA) Single Cell Lysis Solution 4℃保存乳糖發(fā)酵管進口、國產(chǎn)乳糖發(fā)酵管20支BR
100µL 小鼠抗Flag標簽單抗 Anti Flag-Tag Mouse MAb -20℃保存臘樣芽胞桿菌選擇瓊脂基礎(chǔ)進口、國產(chǎn)Bacilus Cereus Selective Agar Base用于臘樣芽胞桿菌選擇性分離培養(yǎng)250
葡萄糖(腦膜炎奈瑟氏菌專用) 20ml/支 0.312-20 ng/mL 人RuvB樣蛋白1(RUVBL1)ELISA試劑盒
2 ug pBaBe-hygro-hTERT pBaBe-hygro-hTERT 低溫運輸,-20℃保存 78-5000 pg/mL 植物源性成分(RBCL)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
250mL Sodium Borate Buffer(硼酸鈉緩沖液),0.5M,pH9.0 Sodium Borate Buffer,0.5M,pH9.0 常溫保存 0.312-20 ng/mL 登革熱病毒Ⅱ型(DFV-Ⅱ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
2 ug pSUPER-EGFP pSUPER-EGFP 低溫運輸,-20℃保存
1mL DNAcryl助沉劑 Acryl DNADOWN 4℃保存
50T 弓形蟲PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 15.6-1000 U/mL 人黑色素抗體(MC Ab)ELISA試劑盒
雪腐鐮刀菌PCR熒光定量檢測試劑盒去乙酰基車葉草苷酸標準品登錄號: 14259-55-3 英文別名: (1S,4aS,5S,7aS)-1-(b-D-Glucopyranosyloxy)-1,4a,5,7a-tetrahydro-5-hydroxy-7-(hydroxymethyl)cyclopenta[c]pyran-4-carboxylic acid 分子式: C16H22O11 分子量: 390.34 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色粉末
鞣花酸標準品英文別名: (4,3-cde)(1)benzopyran-5,10-dione,2,3,7,8-tetrahydroxy-(1)benzopyrano 英文名: Ellagic acid 登錄號: 476-66-4 分子式: C14H6O8 分子量: 302.19 分子結(jié)構(gòu):
酯蟾毒配基標準品英文別名: 14,15-beta-epoxy-3-beta-hydroxy-5-beta-bufa-20,22-dienolide 英文名: Resibufogenin 登錄號: 465-39-4 分子式: C24H32O4 分子量: 384.51 分子結(jié)構(gòu):
華蟾毒精標準品英文別名: 16-beta)-bet;22-dienolide,16-(acetyloxy)-14,15-epoxy-3-hydroxy-,(3-beta,5-beta,15-bufa-2 英文名: Cinobufagin 登錄號: 470-37-1 分子式: C26H34O6 分子量: 442.54 分子結(jié)構(gòu):
二十八烷醇標準品英文別名: 1-Octacosanol, n-Octacosanol 英文名: Octacosanol 登錄號: 557-61-9 分子式: C28H58O 分子量: 410.76 分子結(jié)構(gòu):
1,2,3,4,6-五沒食子酰葡萄糖標準品登錄號: 14937-32-7 英文別名: 1,2,3,4,6-penta-O-galloy-β-D-glucose 分子式: C41H32O26 分子量: 940.68 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色粉末
小檗胺標準品登錄號: 478-61-5 英文別名: (4aS,16aR)-3,4,4a,5,16a,17,18,19-Octahydro-21,22,26-trimethoxy-4,17-dimethyl-16H-1,24:6,9-dietheno-11,15-metheno-2H-pyrido[2',3':17,18][1,11]dioxacycloicosino[2,3,4-ij]isoquinoline-12-ol 分子式: C37H40N2O6 分子量: 608.72 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色結(jié)晶
甲基辛弗林鹽酸鹽標準品英文別名: DL-1-(4-Hydroxyphenyl)-2-methyl-2-methylaminoethanol hydrochloride 英文名: 4-hydroxyephedrine hydrochloride 登錄號: 7437-54-9 分子式: C10H16ClNO2 分子量: 217.69 分子結(jié)構(gòu):
異澤蘭黃素標準品英文別名: 2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-5,7-dihydroxy-6-methoxychromen-4-one 英文名: Eupatilin 登錄號: 22368-21-4 分子式: C18H16O7 分子量: 344.32 分子結(jié)構(gòu):
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