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產(chǎn)地 | 國(guó)產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 | 貨號(hào) | BJ-P6781 |
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
三線鐮刀菌PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒 | Fusarium tricinctumPCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6781 |
特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲(chǔ)存條件:-20℃以下,有效期12個(gè)月。
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 | 三、注意事項(xiàng) 1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。 2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。 3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。 4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
艾格LT100肉湯 250g 0.156-10 ng/mL 人酐Ⅸ(Carbonic anhydrase 9)ELISA試劑盒
1套 可逆性銅染試劑盒 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Hepatitis A virus cellular receptor 1
2 ug pAP1(PMA)-Luc pAP1(PMA)-Luc 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pCMV-Flag-3 pCMV-Flag-3 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Bone sialoprotein 2
250mL Phosphate Buffer,0.5M, pH6.5 Phosphate Buffer,0.5M, pH6.5 常溫保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Insulin-like growth factor-binding protein 6
2 ug pBBR1-MCS5 pBBR1-MCS5 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Amine oxidase [flavin-containing] B
溶液(20mg) 1ml*5 6.25-400 ng/mL ELISA Kit for Human B-cell CLL/lymphoma 6 member B protein
5mL 乳腺上皮生長(zhǎng)因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Listeria Enrichment Broth Base250克李氏菌二步增菌
50g 干粉 0.156-10 ng/mL 人激肽釋放2(KLK2)ELISA試劑盒
2 ug pEBFP-Mito pEBFP-Mito 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
100次 真菌種屬鑒定 PCR Mix 1(ITS) Fungal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
三線鐮刀菌PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒青陽(yáng)參苷元A標(biāo)準(zhǔn)品登錄號(hào): 新品待定英文名: Qingyangshengenin A 分子式: C29H38O7 分子量: 498.61 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色粉末
決明蒽醌標(biāo)準(zhǔn)品英文別名: 2,8-Dihydroxy-1-methoxy-3-methyl-9,10-anthracenedione 英文名: Obtusifolin 登錄號(hào): 477-85-0 分子式: C16H12O5 分子量: 284.26 分子結(jié)構(gòu):
山麥冬皂苷B標(biāo)準(zhǔn)品英文別名: 25(S)-ruscogenin-1-O-β-D-fucopyranoside-3-O-α-L-rhamnopyranosy 英文名: Liriopesides B 登錄號(hào): 182284-68-0 分子式: C39H62O12 分子量: 722.4 分子結(jié)構(gòu):
3-異倒捻子素標(biāo)準(zhǔn)品登錄號(hào): 19275-46-8 英文別名: 3,4-dihydro-5,9-dihydroxy-8-methoxy-2,2-dimethyl-7-(3-methylbut-2-enyl)pyrano[3,2-b]xanthen-6(2H)-one 分子式: C24H26O6 分子量: 410.46 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 淺黃色結(jié)晶
β-倒捻子素標(biāo)準(zhǔn)品英文別名: 1,6-Dihydroxy-3,7-dimethoxy-2,8-bis(3-methyl-2-butenyl)-9H-xanthen-9-one;1,6-Dihydroxy-3,7-dimethoxy-2,8-bis(3-methyl-2-buten-1-yl)-9H-xanthen-9-one 英文名: Beta-mangostin 登錄號(hào): 20931-37-7 分子式: C25H28O6 分子量: 424.49 分子結(jié)構(gòu):
梭砂貝母堿標(biāo)準(zhǔn)品英文別名: Cevane-3,6-diol(3β,5α,6β,17β) 英文名: Hupehenine 登錄號(hào): 98243-57-3 分子式: C27H45NO2 分子量: 415.65 分子結(jié)構(gòu):
左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)品英文別名: - CARBOXY-N,N,N-TRIMETHYL-2-PROPEN-1-AMINIUM CHLORIDE; 英文名: L-carnitine 登錄號(hào): 541-15-1 分子式: C7H15NO3 分子量: 161.2 分子結(jié)構(gòu):
人參皂苷CK標(biāo)準(zhǔn)品登錄號(hào): 39262-14-1 英文別名: 20(S)-Ginsenoside C-K;(20S)-20-(β-D-Glucopyranosyloxy)dammara-24-ene-3β,12β-diol 分子式: C36H61O8 分子量: 621.88 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色粉末
(R型)原人參二醇標(biāo)準(zhǔn)品登錄號(hào): 新品待定英文別名: (R)Protopanaxdiol 分子式: C30H52O3 分子量: 460 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色粉末
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