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豬霍亂病毒即PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒 分子生物學(xué)儀器
產(chǎn)地 | 國(guó)產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 | 貨號(hào) | BJ-P6703 |
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
糞腸球菌PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒 | Enterococcus faecalis PCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6703 |
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲(chǔ)存條件:-20℃以下,有效期12個(gè)月。
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 | 三、注意事項(xiàng) 1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。 2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。 3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。 4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
100 mg MEQ,(6-甲氧-N-乙基) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存 0.78-50 ng/mL 人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒
2 ug pGL3- enhancer pGL3- enhancer 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 1.56-100 ng/ml 人組織蛋白C(CTS-C)ELISA試劑盒
500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH4.5 Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH4.5 常溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ubiquitin-associated protein 2
尿素 20支 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Growth/differentiation factor 2
2 ug pBAD18 pBAD18 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Multidrug resistance-associated protein 6
100g 聚乙烯吡咯烷酮 K360 Polyvinylpyrrolidone(PVP K360) 室溫保存 0.312-20 ng/mL 人鈣調(diào)素(RC)ELISA試劑盒
1.5mL DNA尿素-PAGE上樣液 DNA Urea-PAGE Loading Buffer -20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Kallikrein-6
25uL Cy5-dCTP溶液 (10 mM) Cy5-dCTP Solution -20℃保存
10mL 氨芐溶液,50mg/mL Ampicillin Solution -20℃保存 312-20000 pg/mL ELISA Kit for Human Pikachurin
2 ug pLVX-mCherry-N1 pLVX-mCherry-N1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Protransforming growth factor alpha
七葉苷培養(yǎng)基 Esculin Medium 10 15.6-1000 pg/mL 人輔Q結(jié)合蛋白COQ10同系物B(CQ10B)ELISA試劑盒
糞腸球菌PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒擬人參皂苷-Rh2標(biāo)準(zhǔn)品分子式:C36H62O8 英文名:3-O-β-D-glucopyranosyl-3β,12β,25-trihydroxyldammar-(E)-20(22)-ene 分子量: 號(hào):1370264-16-6 檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
老鸛草素標(biāo)準(zhǔn)品分子式:C41H28O27 英文名:Geraniin 分子量:952.64 號(hào):60976-49-0 檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
槲皮苷標(biāo)準(zhǔn)品分子式:C21H20O11 英文名: Quercitrin 分子量:448.38 號(hào):522-12-3 檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龍膽雙糖苷標(biāo)準(zhǔn)品分子式: C33H40C22 英文名: Quercetin-3-O-b-D-glucose-7-O-b-D-gentiobiosiden 分子量: 788.21 號(hào): 檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
槲皮素標(biāo)準(zhǔn)品分子式:C15H10O7 英文名:Quercetin 分子量:302.24 號(hào):117-39-5 檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
虎杖苷標(biāo)準(zhǔn)品分子式:C20H22O8 英文名:Polydatin 分子量:390.38 號(hào):27208-80-6 檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī) 格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
花椒毒酚標(biāo)準(zhǔn)品分子式: C11H6O4 英文名:Xanthotol 分子量: 202.16 號(hào): 2009-24-7 檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
花椒毒素標(biāo)準(zhǔn)品分子式: C12H8O4 英文名:8-Methoxypsoralen 分子量: 216.19 號(hào): 298-81-7 檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
花旗松素標(biāo)準(zhǔn)品分子式:C15H12O7 英文名: Taxifolin 分子量:304.25 號(hào):480-18-2 檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
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