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貨號 | BJ-01R3586 |
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產(chǎn)品名稱:軟骨染色液價格
貨號:BJ-01R3586
規(guī)格:100ml
分類:骨組織染色
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:軟骨染色
注意事項:硼酸鹽溶液配制,甲苯胺藍(lán)中的陽離子與組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)結(jié)合而被染色。染色結(jié)果為:細(xì)胞核呈藍(lán)色,而肥大細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有肝素等異色性物質(zhì)呈異染性紫紅色。
注意事項:
1、盡注意無菌操作,避免污染。
2、避免反復(fù)凍融。
3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:
1.直接配制法 對于純凈的物質(zhì)(稱做基準(zhǔn)物質(zhì))可準(zhǔn)確進(jìn)行稱量,用蒸餾水溶解后,轉(zhuǎn)移到一定容積的容量瓶中稀釋至標(biāo)線,溶液的準(zhǔn)確濃度可以直接計算出來。溶質(zhì)的純度、性質(zhì)等對濃度有較大影響,為此,對用來直接配制標(biāo)準(zhǔn)溶液用的基準(zhǔn)物質(zhì)必須具備以下條件:
(1)物質(zhì)的純度要高,含量不得低于99.9%,雜質(zhì)的含量應(yīng)當(dāng)少到可以忽略的程度。
(2)物質(zhì)的分子組成應(yīng)與其化學(xué)式*符合,包括結(jié)水合物中的結(jié)品水含量也必須與其化學(xué)式相符合。如硼砂Na2B4O7·10H2O等。
(3)性質(zhì)穩(wěn)定,貯蔵時應(yīng)不發(fā)生變化,不易吸收空氣中的水分、二氧化碳等氣體而改變其成分,不易風(fēng)化潮解和被空氣氧化,烘干時不易分解等。此外最好使用分子量較大的基準(zhǔn)物質(zhì)以減小稱量誤差。
2.間接配制法 凡不符合基準(zhǔn)物質(zhì)條件的物質(zhì),可先配制成近似所需濃度的溶液,再用基準(zhǔn)物質(zhì)溶液或能與其發(fā)生定量反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定,求其準(zhǔn)確濃度,這種通過滴定來確定準(zhǔn)確濃度的操作叫做“標(biāo)定"。間接法配制近似濃度溶液時不需用分析天平稱量和容量瓶配制,可用臺秤、量筒等器皿。將稱好的物質(zhì)轉(zhuǎn)移到干凈的試劑瓶中,先加少量蒸餾水將其溶解,繼續(xù)用量筒加蒸餾水至需要量即可。由于大多數(shù)試劑不符合基準(zhǔn)物的條件,故間接法配制標(biāo)準(zhǔn)溶液是經(jīng)常的。如固體NaOH因易吸收空氣中的水分而潮解和吸收CO2使表面變質(zhì);濃鹽酸因易揮發(fā)而無法準(zhǔn)確稱量;不易得到分析純級的試劑等,這些物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液須用間接法來配制,經(jīng)標(biāo)定后再做標(biāo)準(zhǔn)溶液使用。
標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定:
1.用基準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)定法
(1)多次稱量法 用減重法精密稱取幾份(如2~3份)基準(zhǔn)物質(zhì),分別倒入編號的干凈錐形瓶(或燒杯)內(nèi),各加少量蒸餾水溶解,再加指示劑后分別用待標(biāo)定溶液滴定至等當(dāng)點,各自記錄所消耗待標(biāo)定溶液的體積,結(jié)合基準(zhǔn)物質(zhì)的重量分別算出溶液的準(zhǔn)確濃度,最后取平均值做為標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。
(2)移液管法 精密稱取一份基準(zhǔn)物質(zhì),在干凈的小燒杯內(nèi)加少量蒸餾水溶解,順玻棒全部轉(zhuǎn)移到已校正好的容量瓶中,多次沖洗燒杯洗液并入容量瓶中,最后配成一定體積的溶液,混勻。每次滴定用配套的移液管吸取并轉(zhuǎn)移至錐形瓶中,加指示劑后用待標(biāo)定溶液滴定至等當(dāng)點,每次做好記錄,根據(jù)所消耗待標(biāo)定溶液的體積,結(jié)合基準(zhǔn)物質(zhì)的重量,分別算出溶液的準(zhǔn)確濃度取平均值做為標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。
2.比較法標(biāo)定 如果待標(biāo)定溶液能與某標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行反應(yīng),可吸量一定體積的某標(biāo)準(zhǔn)溶液,用待標(biāo)定溶液滴定,或吸量一定體積的待標(biāo)定溶液,用某標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定。根據(jù)兩溶液所消耗的毫升數(shù)及某標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,按N1V1=N2V2式可以計算出待標(biāo)定溶液的準(zhǔn)確濃度。這種用標(biāo)準(zhǔn)落液來測定待標(biāo)定溶液準(zhǔn)確濃度的過程稱為“比較法"標(biāo)定。如果某標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度由于某些原因不夠準(zhǔn)確時,就會直接影響待標(biāo)定溶液濃度的準(zhǔn)確性,顯然比較法不如用基準(zhǔn)物質(zhì)直接標(biāo)定的方法精確,但比較法簡便易行。
標(biāo)定完畢,蓋緊標(biāo)準(zhǔn)溶液試劑瓶塞,瓶簽上注明標(biāo)準(zhǔn)溶液名稱、準(zhǔn)確濃度和日期等。
Fusarium equiseti木賊鐮刀探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周CHK1/CHEK1 細(xì)胞周期檢測點激1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Arisaema cum bile LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周Mouse Anti-rabbit IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml
Taylorella equigenitalis馬生殖泰勒氏LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周phospho-ATRIP (Ser68+Ser72) 系統(tǒng)性紅斑狼瘡先關(guān)蛋白TREX1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mecistocirrus digitatus牛捻轉(zhuǎn)胃蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周MUL1/RNF218 E3泛素連接MUL1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Enteric Virus-72(EV-72)腸道病毒72型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周phospho-ROCK2(Tyr256) 磷酸化Rho相關(guān)蛋白激2抗體 規(guī)格: 0.1ml
甲型流感()H1N1/H3亞型雙重染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周AHNAK2 AHNAK核蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Poliovirus(PV)脊髓灰質(zhì)炎病毒通用型RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Phospho-NFKB1(Ser903) 磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
貓源性成分PCR檢測試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周E2EPF 泛素交聯(lián)抗體 規(guī)格: 0.2ml
Herba lobeliae chinensis半邊蓮染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周CADM3/IGSF4B 細(xì)胞粘附分子3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Salmonella dublin都柏林沙門氏LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Rabbit Anti-Bov IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗牛IgG 規(guī)格: 0.3ml
軟骨染色液價格ATXN7L1 共濟(jì)失調(diào)7樣1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Integrin alpha 2/CD49b 整合α2抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-INPPL1(Ser576) 肌聚磷鹽磷樣1抗體 規(guī)格: 0.1ml
BRP44 腦44抗體 規(guī)格: 0.2mlFbx15 Fbx15抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-PPAR Gamma (ser112) 磷化過氧化活化增生受體γ抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-human IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml
Lefty/TGF beta 4 轉(zhuǎn)化生因子β4抗體TGF β4 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml
CD56/NCAM1 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1抗體 規(guī)格: 0.1ml
TRPC3 色氨相關(guān)3抗體 規(guī)格: 0.1mlHER4/ErbB4 HER4抗體 規(guī)格: 0.1ml
TRAP/Tartrate Resistant Acid Phosphatase 端粒調(diào)節(jié)相關(guān)抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD55/DAF 衰變加速因子CD55抗體 規(guī)格: 0.1ml
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
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