一、樣品 DNA 的制備

用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。

二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。

1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。

3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。

4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。

5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。

6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。

7. NC 管中不加任何陽性對照。

8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

服務(wù)流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱：西方蜜蜂微孢子蟲熒光定量PCR試劑盒探針法

英文名稱：Nosema apis

貨號:BJ-P9878

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

運(yùn)輸：低溫

注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

實(shí)驗(yàn)外包:

基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、使用方法:

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建

特點(diǎn)優(yōu)勢：

1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。

硝酸纖維素薄膜(NC膜)0.45μm 9cm×10cm20片

硝酸纖維素薄膜(NC膜)0.22μm 9cm×10cm20片

麗春紅染色液(10×)12ml

Western半干法轉(zhuǎn)膜液(固體)(1×干粉)1包

麗春紅染色液(1×)100ml

Western半干法轉(zhuǎn)膜液(固體)(10×干粉)1包

WB轉(zhuǎn)印濾紙(12.5cm×12.5cm，100張/包)100張

PVDF膜(進(jìn)口分裝),0.45μm,13.5cm×10cm,10張/包1包

PVDF膜(進(jìn)口分裝),0.20μm,13.5cm×10cm,10張/包1包

蛋白質(zhì)銀染檢測試劑40次

西方蜜蜂微孢子蟲熒光定量PCR試劑盒探針法雪貂 CD20 / MS4A-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)組織過氧化氫（HYDROGEN PEROXIDE）活性熒光定量檢測試劑盒  20次

人 F9 / FIX / Factor IX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)血液過氧化氫（HYDROGEN PEROXIDE）活性熒光定量檢測試劑盒  20次

人 FST / Follistatin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)體液過氧化氫（HYDROGEN PEROXIDE）活性熒光定量檢測試劑盒  20次

大鼠 ACE2 / ACEH 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)植物過氧化氫（HYDROGEN PEROXIDE）活性熒光定量檢測試劑盒  20次

小鼠 EPHB1 / EPHT2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)細(xì)胞二胺氧化（DAO）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 LBP / Lipopolysaccharide Binding 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)組織二胺氧化（DAO）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 LOXL2 / Lysyl oxidase homolog 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)血液二胺氧化（DAO）活性比色法定量檢測試劑盒  20/50次

人 ILKAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)體液二胺氧化（DAO）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 GOLM1 / GP73 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)細(xì)胞二胺氧化（DAO）活性熒光定量檢測試劑盒  20次

小鼠 TCN2 / Transcobalamin-II 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)組織二胺氧化（DAO）活性熒光定量檢測試劑盒  20次

人 BLNK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)血液二胺氧化（DAO）活性熒光定量檢測試劑盒  20次