一、樣品 DNA 的制備

用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。

二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。

3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。

4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。

5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。

6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。

7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。

8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

服務(wù)流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱：肉色諾卡菌熒光定量PCR試劑盒探針法

英文名稱：Nocardia carnea

貨號(hào):BJ-P9872

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

運(yùn)輸：低溫

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

實(shí)驗(yàn)外包:

基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、使用方法:

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測(cè)：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：

1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。

4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。

5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

封閉液(用PBS配置，不含去垢劑)Blocking Buffer(PBS)100ml

麗春紅染色液Ponceau S Staining Solution120ml

FITC抗小鼠免疫熒光染色試劑盒Immunol Fluorence Staining Kit with FITC-Labeled Goat Anti-Mouse IgG>300次

DyLight 405抗小鼠免疫熒光染色試劑盒DyLight 405(Immunol Fluorence Staining Kit with DyLight 405-Labeled Goat Anti -Mouse IgG>300次

辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素HRP-Streptavidin200μl

Cy3抗小鼠免疫熒光染色試劑盒Immunol Fluorence Staining Kit with Cy3-Labeled Goat Anti-Mouse IgG>300次

Alexa Fluor 647抗小鼠免疫熒光染色試劑盒Immunol Fluorence Staining Kit with Alexa Fluor 647-Labeled Goat Anti-Mouse IgG>300次

Alexa Fluor 555抗小鼠免疫熒光染色試劑盒Immunol Fluorence Staining Kit with Alexa Fluor 555-Labeled Donkey Anti-Mouse IgG>300次

Alexa Fluor 488抗小鼠免疫熒光染色試劑盒Immunol Fluorence Staining Kit with Alexa Fluor 488-Labeled Goat Anti-Mouse IgG>300次

AMCA抗小鼠免疫熒光染色試劑盒Immunol Fluorence Staining Kit with AMCA-Labeled GoatAnti-Mouse IgG>300次

肉色諾卡菌熒光定量PCR試劑盒探針法小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)血液誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞一氧化氮合成（（iNOS /NOS2/mNOS））活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  20次

小鼠 IFNA13 / Interferon alpha-13 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)體液誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞一氧化氮合成（（iNOS /NOS2/mNOS））活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  20次

小鼠 IFNA4 / Interferon alpha-4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)細(xì)胞結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成（cNOS/NOS3/eNOS）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  20次

小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)組織結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成（cNOS/NOS3/eNOS）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  20次

乙型流感 (B/Brisbane/60/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)血液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成（cNOS/NOS3/eNOS）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  20次

小鼠 IL1R1 / CD121a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)體液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成（cNOS/NOS3/eNOS）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  20次

甲型流感 H3N2 (A/Babol/36/2005) 神經(jīng) (Neuraminidase/NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)細(xì)胞結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成（cNOS/NOS1/nNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒  20次

小鼠 OSMR / IL-31RB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)組織結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成（cNOS/NOS1/nNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒  20次

人 ULBP2 / N2DL-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)血液結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成（cNOS/NOS1/nNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒  20次

人 ULBP2 / N2DL-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)體液結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成（cNOS/NOS1/nNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒  20次

小鼠 4-1BB / TNFRSF9 / CD137 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)細(xì)胞誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞一氧化氮合成（iNOS /NOS2/mNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒  20次