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備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
產(chǎn)品名稱 | 大鼠環(huán)孢素A(CsA)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Rat cyclosporine A (CsA) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G9649 |
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
人硫酸乙酰肝素(HS)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 別稱:HS Human HS(Heparan Sulfate) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組HS濃度
人膠質細胞源性連接蛋白(GDN)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 別稱:SERPINE2 , GDN, GDNPF, PI-7, PI7, PN-1, PN1, PNI Human GDN(Glia Derived Nexin) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組GDN濃度
人谷胱甘肽S-轉移酶α1(GSTα1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 別稱:GSTA1, GST2, GSTA1-1, GTH1 Human GSTα1(Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組GSTα1濃度
二去甲基佐米曲坦 Didesmethyl Zolmitriptan 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatCoicoseroneELISAKit大鼠皮質同(Coicoserone)規(guī)格:96T/48T
N-去甲基佐米曲坦 N-Desmethyl Zolmitriptan 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatCoisolELISAKit大鼠皮質醇(Coisol)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
佐米曲坦 N氧化物 Zolmitriptan N-Oxide 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatCoisolELISAKit大鼠皮質醇(Coisol)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
雌莫司汀 Estramustine 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatCPAFELISAKIT大鼠沙眼衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)規(guī)格:96T/48T
氨磷汀 Amifostine 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatCRHELISAKit大鼠促腎上皮質激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氨磷汀硫醇二鹽酸 Amifostine Thiol Di 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatCRHELISAKit大鼠促腎上皮質激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
貝那普利游離堿 Benazepril Free base 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatCrossLapsELISAKit大鼠骨原交聯(lián)(CrossLaps)規(guī)格:96T/48T
拉莫三嗪-13C3 Lamotrigine-13C3 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatCrossLapsELISAKit大鼠骨原交聯(lián)(CrossLaps)規(guī)格:96T/48T
D-半乳糖醛酸甲酯 D-Galacturonic acid methyl ester 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatCTELISAKit大鼠降鈣素(CT)規(guī)格:96T/48T
D-半乳糖醛酸鈉鹽 D-Galacturonic acid salt 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatCTELISAKit大鼠降鈣素(CT)規(guī)格:96T/48T
英文名稱Ratcholesterolesteransferprotein大鼠膽酯轉移蛋白(CETP)規(guī)格:96T/48T 西咪替丁-d3 Cimetidine-d3 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱Ratcholesterolesteransferprotein大鼠膽酯轉移蛋白(CETP)規(guī)格:96T/48T N-去甲基氯氮平-d8 N-Desmethyl Clozapine-d8 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱RatCoicoserone大鼠皮質同(Coicoserone)規(guī)格:96T/48T N-去甲基-d3佐米曲坦 N-Desmethyl-d3 Zolmitriptan 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱RatCoicoserone大鼠皮質同(Coicoserone)規(guī)格:96T/48T 二去甲基佐米曲坦 Didesmethyl Zolmitriptan 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱RatCoisol大鼠皮質醇(Coisol)規(guī)格:96T/48T N-去甲基佐米曲坦 N-Desmethyl Zolmitriptan 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱RatCoisol大鼠皮質醇(Coisol)規(guī)格:96T/48T 佐米曲坦 N氧化物 Zolmitriptan N-Oxide 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱RatCPAF大鼠沙眼衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)規(guī)格:96T/48T 雌莫司汀 Estramustine 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱RatCRH大鼠促腎上皮質激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氨磷汀 Amifostine 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱RatCRH大鼠促腎上皮質激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氨磷汀硫醇二鹽酸 Amifostine Thiol Di 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱RatCrossLaps大鼠骨原交聯(lián)(CrossLaps)規(guī)格:96T/48T 貝那普利游離堿 Benazepril Free base 質量規(guī)格:美國進口
大鼠環(huán)孢素A(CsA)elisa進口試劑盒Humankillercellimmnoglobulin-likereceptor,KIRELISAKit 人殺傷細胞球蛋白樣受體(KIR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 Fmoc-L-纈氨酸 Fmoc-Val-OH 質量規(guī)格:>98%,BR
Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISA試劑盒人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Fmoc-N-三苯甲基-L-天冬酰胺 Fmoc-Asn(Trt)-OH 質量規(guī)格:>98%,BR
植物基因組DNA化試劑盒(低多糖/酚)50 N'-芴甲氧羰基-N-芐氧羰基-L-賴氨酸 Fmoc-Lys(Z)-OH 質量規(guī)格:≥98%,BR
Humanα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Fmoc-L-賴氨酸鹽酸鹽 Fmoc-Lys-OH·HCl 質量規(guī)格:0.98
小鼠膠原交聯(lián)(PYD)ELISA試劑盒 ,英文名: PYD ELISA Kit 氧化白藜蘆醇(標準品) Oxyresveratrol 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA檢測試劑盒Ratamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit 96T/48T 氧化白藜蘆醇 Oxyresveratrol 質量規(guī)格:≥98%,BR
人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)試劑盒 Human MAPKAPK3 ELISA Kit 乙酰化白藜蘆醇(標準品) Acetyl-resveratrol 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
RatsolubleIerleukin2recepter,IL-2sRELISAKit大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 乙酰化白藜蘆醇 Acetyl-resveratrol 質量規(guī)格:≥98%,BR
Humancytomegalovirus(HCMV)RFLP基因分析試劑盒20 Fmoc-N'-甲基三苯甲基-L-賴氨酸 Fmoc-Lys(Mtt)-OH 質量規(guī)格:0.98
Mouseβ-catenin,β-catELISA試劑盒小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芴甲氧羰基-O-芐基-L-蘇氨酸 Fmoc-Thr(Bzl)-OH 質量規(guī)格:0.98
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