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備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
產(chǎn)品名稱 | 大鼠凝血酶受體(TR)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Rat thrombin receptor (TR) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G9697 |
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好
用途:科研實驗等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
人胃蛋白酶原A(PGA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 別稱:PGA Human PGA(Pepsinogen A) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組PGA濃度
人前列腺特異性抗原前體(proPSA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 別稱:proPSA Human proPSA(precursor of Prostate Specific Antigen) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組proPSA濃度
人結(jié)合珠蛋白(HP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 別稱:Hpt, BP, Hp2-Alpha, HPA1S, Zonulin Human HP(Haptoglobin) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組HP濃度
丹酚酸B二甲酯 HPLC≥90% 20mg PASE-6蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25
丹酚酸C HPLC≥98% 20mg PASE-6蛋白共沉淀分析試劑盒5
丹酚酸D HPLC≥98% 20mg PASE-7蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25
丹寧酸 Purity≥98% 20mg PASE-7蛋白共沉淀分析試劑盒5
丹皮酚 HPLC≥98% 20mg PASE-8蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25
丹皮酚磺酸鈉 HPLC≥98% 20mg PASE-8蛋白共沉淀分析試劑盒5
丹皮酚新苷 HPLC≥98% 20mg PASE-9蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25
丹皮酚原苷 HPLC≥98% 20mg PASE-9蛋白共沉淀分析試劑盒5
丹葉大黃素 HPLC≥98% 20mg Cdc42鳥苷酸酶活性分析試劑盒6
單咖啡酰 HPLC≥98% 20mg CDK2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
PASE-6蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25 丹酚酸B二甲酯 HPLC≥90% 20mg
PASE-6蛋白共沉淀分析試劑盒5 丹酚酸C HPLC≥98% 20mg
PASE-7蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25 丹酚酸D HPLC≥98% 20mg
PASE-7蛋白共沉淀分析試劑盒5 丹寧酸 Purity≥98% 20mg
PASE-8蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25 丹皮酚 HPLC≥98% 20mg
PASE-8蛋白共沉淀分析試劑盒5 丹皮酚磺酸鈉 HPLC≥98% 20mg
PASE-9蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25 丹皮酚新苷 HPLC≥98% 20mg
PASE-9蛋白共沉淀分析試劑盒5 丹皮酚原苷 HPLC≥98% 20mg
Cdc42鳥苷酸酶活性分析試劑盒6 丹葉大黃素 HPLC≥98% 20mg
CDK2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 單咖啡酰 HPLC≥98% 20mg
大鼠凝血酶受體(TR)elisa進口試劑盒人腸三葉因子(ITF)試劑盒 Human Iestinal efoil factor,ITF ELISA Kit 噻嗪二酮苷(標準品) Xanthiside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Ratthrombieceptor,ELISAKit大鼠凝血酶受體()ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 多被銀蓮花皂苷R8(標準品) Raddeanoside R8 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
LAMBDA噬菌體培養(yǎng)試劑盒10 虎掌草皂甙D(標準品) 無 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
PlaVitaminE,VEEELISA試劑盒植物維生素E(VE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Prosapogenin CP6 Prosapogenin CP6 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶23B(MMP23B)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP23B ELISA Kit Crovatin Crovatin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA檢測試劑盒HumanHyaluronidase,HAaseELISAKit 96T/48T Croverin Croverin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠纖溶酶原(Plg)試劑盒 Rat Plasminogen,Plg ELISA kit levatin levatin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
英文名稱RatangiotensinogenELISAKit大鼠血管緊張素原(aGT)規(guī)格:96T/48T 蒼耳亭(標準品) Xanthatin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
果菜類食物DNA分離試劑盒10 辛辣內(nèi)酯A(標準品) Pungiolide A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
ELISAKitOLAb人氧化低密度脂蛋白抗體規(guī)格:48T/96T 麻楓樹酚酮B(標準品) Jatropholone B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
我司供應(yīng)的elisa進口試劑盒免費代測,全程ELISA試劑盒實驗技術(shù)指導(dǎo),免費代做實驗,索取產(chǎn)品說明書。
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